糖尿病大鼠骨折愈合過(guò)程中VEGF、BMP-2、IGF-Ⅰ變化的實(shí)驗(yàn)觀察.pdf

1、背景：研究認(rèn)為局部血液供應(yīng)是影響骨折愈合的重要因素，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor VEGF)作為影響血液供應(yīng)最重要的因素，在骨折愈合過(guò)程起重要作用。隨著細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的研究進(jìn)展，骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(Bone morphogenetic protein-2BMP-2)、胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ(Insulin-like growth factor Ⅰ IGF-I)等細(xì)胞因子在骨

2、折愈合過(guò)程中的作用日益受到重視。臨床上糖尿病骨折延遲愈合常見(jiàn)，而糖尿病骨折愈合過(guò)程中VEGF、BMP-2、IGF-I變化尚無(wú)系統(tǒng)研究。 目的：通過(guò)測(cè)定糖尿病大鼠骨折后血清和骨折局部骨痂中VEGF、BMP-2、IGF-I水平變化，探討影響糖尿病骨折愈合的分子生物學(xué)機(jī)制，試圖為發(fā)現(xiàn)新的治療糖尿病骨折愈合方法打下理論基礎(chǔ)。 方法：取wistar雄性大鼠70只，體重250-300 g，隨機(jī)分為兩組，每組35只。一組為實(shí)驗(yàn)組，腹腔

3、內(nèi)注射鏈脲佐菌素(STZ)破壞胰島細(xì)胞誘導(dǎo)為糖尿病大鼠；另一組為對(duì)照組。無(wú)菌操作下用線鋸鋸斷兩組大鼠左脛骨，然后復(fù)位外固定。分別于術(shù)后第1、2、3、4、6、8周取靜脈血保留血清；拍大鼠左下肢X線片觀察骨折愈合情況；取骨折斷端組織行HE染色光鏡觀察、免疫組化檢測(cè)VEGF、BMP-2、IGF-Ⅰ；酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)檢測(cè)血清VEGF、BMP-2、IGF-Ⅰ，兩組比較。利用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，P<0.05表示統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、上差異有顯著性，P<0.01表示統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異非常顯著。 結(jié)果：1)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠比較，術(shù)后1、2、3、4、6、8周x線片上骨痂生成量均減少。 2)HE染色鏡下觀察實(shí)驗(yàn)組骨形成滯后。 3)3周VEGF免疫組化灰度值兩組間有顯著性差異，(實(shí)驗(yàn)組142.8±3.8；對(duì)照組128.0±5.5，P<0.01)；2周BMP-2免疫組化灰度值兩組間有顯著性差異，(實(shí)驗(yàn)組140.0±3.1；對(duì)照組120.8±5.0，P<0.01)；2周IG

5、F-Ⅰ免疫組化灰度值兩組間有顯著性差異，(實(shí)驗(yàn)組143.4±3.5；對(duì)照組128.8±5.6，P<0.01)。 4) ELISA法檢測(cè)兩組 2 周血清中BMP-2、IGF-Ⅰ有顯著性差異，兩組血清VEGF未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論；糖尿病大鼠骨折后血清及局部骨痂組織中BMP-2、IGF-Ⅰ減少是導(dǎo)致糖尿病大鼠骨折愈合差的原因之一；BMP-2、IGF-Ⅰ之間可能存在相互協(xié)同作用；糖尿病大鼠骨折局部骨痂組織與血清VEGF變化趨勢(shì)不一致，