桃紅四物湯對慢性肝病模型小鼠肝壞死性炎癥和纖維化的作用及機(jī)理研究.pdf

1、桃紅四物湯原名加味四物湯，載于《醫(yī)壘元戎》，錄自《玉機(jī)微義》，是在四物湯的基礎(chǔ)上加桃仁、紅花而成，是活血化瘀之代表方。桃紅四物湯在臨床上應(yīng)用廣泛，近年的研究表明桃紅四物湯具有調(diào)控病理性血管生成的作用。慢性肝損傷伴肝纖維化發(fā)展過程中存在明顯的病理性血管生成與重構(gòu)，阻礙了肝纖維化的逆轉(zhuǎn)與恢復(fù)。通過桃紅四物湯對病理性血管生成作用的研究，發(fā)現(xiàn)部分活血化瘀中藥具有抑制病理性血管生成的作用，抗病理性血管生成可能是活血化瘀藥的現(xiàn)代藥理作用之一。因而從

2、整體水平研究桃紅四物湯對慢性肝損傷伴早期肝纖維化小鼠的治療作用及作用機(jī)理可以為臨床慢性肝損傷及早期肝纖維化的治療提供實驗依據(jù)。
　　目的:從整體水平研究復(fù)方桃紅四物湯(Tao-Hong-Si-Wu Decoction,THSWD)對四氯化碳所致慢性肝損傷伴肝纖維化模型小鼠肝組織病理結(jié)構(gòu)的變化、肝功能相關(guān)生化指標(biāo)、血清中透明質(zhì)酸和層粘連蛋白的含量、肝組織血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth fac

3、tor, VEGF)、含激酶插入?yún)^(qū)受體(kinase insert domain containing receptor, KDR)及Flt-1蛋白與mRNA表達(dá)的影響。
　　方法:昆明種小鼠60只，隨機(jī)數(shù)字法分組為空白組、模型組、秋水仙堿對照組、桃紅四物湯高中低(17.00g/kg、8.50g/kg、4.25g/kg)劑量組，采用左側(cè)腹股溝處皮下注射四氯化碳花生油溶液建立小鼠慢性肝損傷伴纖維化模型;給藥6周后，摘眼球取血，提取血

4、清進(jìn)行肝功能相關(guān)指標(biāo)檢測，固定肝組織，制作病理切片;并運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)肝組織VEGF蛋白含量;蛋白印跡法(Westem blotting)測定小鼠肝臟AKT、pAKT、KDR和Flt-1蛋白的表達(dá);逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcriptionpolymerase chain reaction, RT-PCR)法測定小鼠肝組織VEGF、KDR

5、、Flt-1及AKT mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.通過組織病理學(xué)觀測和血清學(xué)檢測，THSWD中藥復(fù)方組及秋水仙堿組病理切片與模型組相比，肝組織病變明顯較輕，肝小葉結(jié)構(gòu)輕度紊亂，僅在少數(shù)區(qū)域見不完整的假小葉形成。肝細(xì)胞脂肪變性較輕，散在少量點狀壞死。肝竇擴(kuò)張不明顯，匯管區(qū)稍擴(kuò)大，僅見少量炎細(xì)胞浸潤，纖維組織輕度增生，部分視野可見少量細(xì)纖維隔。肝臟慢性壞死性炎癥及肝纖維化程度較模型組相對較輕。中藥組與模型組相比肝功能相關(guān)

6、生化指標(biāo)有不同程度的降低。
　　2.經(jīng)THSWD治療后，中藥復(fù)方高、中劑量組肝組織VEGF蛋白表達(dá)量較模型組降低(P＜0.05或P＜0.01)，復(fù)方高、中劑量組及西藥秋水仙堿組AKT蛋白表達(dá)量明顯低于模型組(P＜0.01)。西藥秋水仙堿組及THSWD高劑量組pAKT蛋白表達(dá)量明顯低于模型組(P＜0.01或P＜0.05)。中藥高劑量組肝組織KDR與Flt-1蛋白表達(dá)較模型組降低(P＜0.05)，低劑量組較之無差異;而THSWD高中劑