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1、目的:明確桃紅四物湯對(duì)缺血性卒中耐受性的影響以及對(duì)神經(jīng)血管單元損傷的防治作用。最終為桃紅四物湯用于腦卒中的臨床防治提供新的理論依據(jù),具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。
方法:以暫時(shí)性大腦中動(dòng)脈阻塞構(gòu)建大鼠缺血性腦卒中模型(MCAO)。首先通過(guò)腦梗死體積、神經(jīng)功能缺陷評(píng)分的測(cè)定,考察缺血至2小時(shí)后,不同劑量桃紅四物湯預(yù)處理對(duì)缺血性卒中耐受性的影響;接著通過(guò)測(cè)定腦水腫和血腦屏障通透性,結(jié)合免疫熒光檢測(cè)血管基底膜蛋白CollagenⅣ、
2、緊密連接結(jié)構(gòu)蛋白o(hù)ccludin和Zonula occludens1(ZO-1)的表達(dá),從而明確桃紅四物湯預(yù)處理是否對(duì)缺血性卒中神經(jīng)血管單元損傷具保護(hù)有作用。最后通過(guò)蛋白免疫印跡和免疫組化檢測(cè)血紅素氧合酶-1(HO-1)的誘導(dǎo)表達(dá)情況,初步探索桃紅四物湯對(duì)神經(jīng)血管單元損傷防治作用的潛在分子機(jī)制。
結(jié)果:桃紅四物湯能夠改善大鼠缺血性卒中的耐受性:與假手術(shù)組相比,MCAO損傷模型組動(dòng)物神經(jīng)功能評(píng)分均值顯著降低,顯示造模成功,與模型
3、組相比,桃紅四物湯提取物0.5、1.0、1.5g·kg-1·day-1組動(dòng)物神經(jīng)功能評(píng)分顯著升高,提示桃紅四物湯提取物對(duì)缺血再灌注引起的大鼠腦損傷具有保護(hù)作用。TTC染色測(cè)定腦梗塞體積顯示與假手術(shù)組相比,MCAO損傷模型組大鼠出現(xiàn)明顯的腦梗死,表明造模成功。而桃紅四物湯提取物0.5、1.0、1.5g·kg-1·day-1組大鼠腦梗死體積明顯低于模型組。同時(shí)發(fā)現(xiàn)桃紅四物湯中劑量組即1.0g·kg-1·day-1效果最好。桃紅四物湯對(duì)神經(jīng)血
4、管單元的損傷具有一定的防治作用:與模型組相比,桃紅四物湯預(yù)處理組可以顯著的降低腦缺血再灌注后腦水腫,減少伊文思藍(lán)循環(huán)入腦量,進(jìn)一步研究表明桃紅四物湯通過(guò)增加血管基底膜蛋白CollagenⅣ表達(dá)以及緊密連接結(jié)構(gòu)蛋白o(hù)ccludin和ZO-1表達(dá),保護(hù)了血腦屏障的功能,降低缺血再灌注造成的腦損傷。桃紅四物湯可以誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)增加,與模型組相比,桃紅四物湯提取物0.5、1.0、1.5g·kg-1·day-1組大鼠大腦皮層的HO-1表達(dá)量及
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