tPA介導的BDNF轉(zhuǎn)換障礙在異丙酚致大鼠腦功能障礙中的機制研究.pdf

1、目的：
　　探討異丙酚對新生大鼠海馬tPA表達的影響以及是否通過影響tPA表達、阻礙腦發(fā)育高峰期海馬proBDNF向mBDNF的成熟轉(zhuǎn)換，最終導致大鼠學習記憶的受損。
　　方法：
　　SD大鼠162只，年齡7天，SPF級，體重介于12g到16g之間，雌性雄性參半。隨機將其分為三組（每組n=54只）：生理鹽水組（C組）為連續(xù)7天注射0.9%NaCl溶液。單次異丙酚注射組（SP組）為前6天連續(xù)注射0.9%NaCl溶液，第7

2、天注射異丙酚。多次異丙酚注射組（RP組）為連續(xù)7天注射異丙酚。各組大鼠均采用腹腔注射異丙酚75mg/kg或0.9%NaCl7.5ml/kg。隨機地選取每組六只大鼠行血糖和血氣測定。建模完成的17d行水迷宮測試大鼠的學習與記憶能力。HE染色法以及尼氏染色法觀測海馬的形態(tài)結(jié)構(gòu)。Western blolt法檢測建模完成的2h、24h、48h、72h、22d五個時間點下tPA蛋白表達的動態(tài)變化，RT-PCR法測定tPA mRNA的改變。West

3、ern blolt法檢測建模完成后22d時proBDNF、mBDNF、Caspase3蛋白表達改變。TUNEL法測定神經(jīng)元的凋亡。
　　結(jié)果：
　　與C組和SP組比較，RP組逃逸時間增加，且在原平臺象限的探索時間以及穿越原平臺所在位置的次數(shù)減少（P＜0.05）；RP組tPA的protein表達于五個時間點均呈顯著地下降趨勢；tPA的mRNA表達也出現(xiàn)明顯的下調(diào)（P＜0.05）；伴隨tPA、mBDNF表達的減弱，proBDNF

4、表達顯著增強（P＜0.05）；RP組海馬神經(jīng)細胞數(shù)量減少且排列紊亂，神經(jīng)元內(nèi)尼氏體明顯減少，部分神經(jīng)元出現(xiàn)變性及壞死；神經(jīng)元凋亡細胞數(shù)量增多，pro-Caspase3表達減低，cleaved-Caspase3表達增高（P＜0.05）。而SP組與C組比較僅24h時tPA的protein表達呈下降趨勢（P＜0.05），其他各結(jié)果比較均沒有統(tǒng)計學顯著性（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　多次注射異丙酚后導致新生大鼠遠期空間學習記憶