大鼠腦出血致多器官功能障礙綜合征腸道機(jī)制的研究.pdf

1、目的建立大鼠腦出血致多器官功能障礙綜合征(MODS)的動(dòng)物模型，研究大鼠腦出血致MODS后血漿內(nèi)毒素含量的變化及肺、小腸、肝和腎的組織病理改變，內(nèi)毒素受體CD14mRNA在肺、小腸、肝、腎等各器官組織的表達(dá)，探討腦出血致MODS的腸道機(jī)制。 方法1.采用立體定向術(shù)在大鼠尾狀核注入膠原酶加肝素建立腦出血致MODS模型，隨機(jī)將96只Wister大鼠分為正常對(duì)照組(n=6)、假手術(shù)組(n=6)、實(shí)驗(yàn)1組(0.4u膠原酶，n=6)和實(shí)驗(yàn)

2、2組(0.8u膠原酶，n=6)，后兩組又分為4h、8h、12h、24h、36h、48h和72h時(shí)相點(diǎn)7個(gè)亞組。 2.觀察術(shù)后各時(shí)相點(diǎn)癥狀、體征變化，檢測(cè)外周血WBC、肝腎功能、心肌酶學(xué)改變，采用改良基質(zhì)顯色法鱟試驗(yàn)測(cè)定血漿內(nèi)毒素的含量。光鏡下觀察腦、肺、小腸、肝和腎組織病理變化，依據(jù)盛志勇院士提出的動(dòng)物全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)和MODS的診斷標(biāo)準(zhǔn)判斷SIRS和MODS的發(fā)生率。 3.應(yīng)用原位雜交實(shí)驗(yàn)和CMIA真彩色

3、醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng)，檢測(cè)表達(dá)CD14mRNA陽(yáng)性顆粒的面密度和光密度，作為細(xì)胞CD14mRNA的相對(duì)含量。 4.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)間差異顯著性檢驗(yàn)采用t檢驗(yàn)、方差分析，以P＜0.05為差異有顯著意義，并進(jìn)行相關(guān)分析。 結(jié)果1.實(shí)驗(yàn)組在膠原酶注射后4h均有明顯血腫形成，24h后血腫基本上不再增大，實(shí)驗(yàn)2組形成的血腫大于實(shí)驗(yàn)1組，其血腫形態(tài)大小相對(duì)恒定，其神

4、經(jīng)功能評(píng)分明顯高于實(shí)驗(yàn)1組(P＜0.01)。 2.實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的體溫、呼吸、ALT、BUN、CR、心肌酶與正常對(duì)照組、假手術(shù)組相比有顯著性差異，并且在24h-48h之間變化最大。實(shí)驗(yàn)2組與實(shí)驗(yàn)1組比較，呼吸、心率、體溫及外周血WBC均存在顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，尤其以外周血WBC差異更加明顯(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)1組SIRS發(fā)生率75.4％，MODS發(fā)生率21.4％，實(shí)驗(yàn)2組SIRS發(fā)生率100％，MODS發(fā)生率

5、67.9％。 3.實(shí)驗(yàn)組血漿內(nèi)毒素含量明顯升高(P＜0.01或P＜0.001)，且實(shí)驗(yàn)2組高于實(shí)驗(yàn)1組(P＜0.01)。血漿內(nèi)毒素于術(shù)后8h開(kāi)始升高，24h達(dá)高峰，在實(shí)驗(yàn)1組72h接近正常；而在實(shí)驗(yàn)2組72h仍維持較高水平。 4.實(shí)驗(yàn)組各時(shí)相點(diǎn)均可見(jiàn)各臟器不同程度的炎性損害，實(shí)驗(yàn)1組在24h-36h時(shí)相點(diǎn)的臟器病理變化較顯著，在48h逐漸消退，72h時(shí)相點(diǎn)基本恢復(fù)正常；實(shí)驗(yàn)2組出血后4h即見(jiàn)肺臟、小腸炎性反應(yīng)，12h后肺

6、、小腸、肝、腎均見(jiàn)非特異性炎癥反應(yīng)，在24h-48h的臟器病理變化較顯著，72h仍見(jiàn)較明顯炎癥反應(yīng)。 5.正常對(duì)照組各器官組織中有少量CD14mRNA表達(dá)，假手術(shù)組僅肺組織CD14mRNA表達(dá)較正常對(duì)照組顯著升高(P＜0.01)，實(shí)驗(yàn)2組肺、小腸、肝組織CD14mRNA表達(dá)顯著升高(P＜0.01)，且隨時(shí)間進(jìn)展組織CD14mRNA表達(dá)迅速升高，24h-36h達(dá)高峰，72h仍維持較高水平，且以肺臟變化最顯著(P＜0.001)。

7、 6.相關(guān)分析表明，實(shí)驗(yàn)2組肺、小腸組織CD14mRNA表達(dá)與血漿內(nèi)毒素呈正相關(guān)。 結(jié)論1.大鼠尾狀核注入0.8U膠原酶加肝素法可以成功的建立腦出血致MODS模型。 2.腦出血后存在重要臟器的炎性病理改變，尤其是腸道黏膜的病理改變和肝功能障礙，為內(nèi)毒素血癥和腸道內(nèi)毒素易位的發(fā)生提供了條件。 3.腦出血后出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥，且各臟器組織內(nèi)毒素受體CD14的表達(dá)上調(diào)，提示內(nèi)毒素可能是刺激組織內(nèi)毒素受體CD14表達(dá)的重