大鼠腦出血致多器官功能障礙綜合征腸道機制的研究.pdf

1、目的建立大鼠腦出血致多器官功能障礙綜合征(MODS)的動物模型，研究大鼠腦出血致MODS后血漿內(nèi)毒素含量的變化及肺、小腸、肝和腎的組織病理改變，內(nèi)毒素受體CD14mRNA在肺、小腸、肝、腎等各器官組織的表達，探討腦出血致MODS的腸道機制。 方法1.采用立體定向術在大鼠尾狀核注入膠原酶加肝素建立腦出血致MODS模型，隨機將96只Wister大鼠分為正常對照組(n=6)、假手術組(n=6)、實驗1組(0.4u膠原酶，n=6)和實驗

2、2組(0.8u膠原酶，n=6)，后兩組又分為4h、8h、12h、24h、36h、48h和72h時相點7個亞組。 2.觀察術后各時相點癥狀、體征變化，檢測外周血WBC、肝腎功能、心肌酶學改變，采用改良基質(zhì)顯色法鱟試驗測定血漿內(nèi)毒素的含量。光鏡下觀察腦、肺、小腸、肝和腎組織病理變化，依據(jù)盛志勇院士提出的動物全身炎癥反應綜合征(SIRS)和MODS的診斷標準判斷SIRS和MODS的發(fā)生率。 3.應用原位雜交實驗和CMIA真彩色

3、醫(yī)學圖象分析系統(tǒng)，檢測表達CD14mRNA陽性顆粒的面密度和光密度，作為細胞CD14mRNA的相對含量。 4.實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(X±S)表示，應用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理，數(shù)據(jù)間差異顯著性檢驗采用t檢驗、方差分析，以P＜0.05為差異有顯著意義，并進行相關分析。 結果1.實驗組在膠原酶注射后4h均有明顯血腫形成，24h后血腫基本上不再增大，實驗2組形成的血腫大于實驗1組，其血腫形態(tài)大小相對恒定，其神

4、經(jīng)功能評分明顯高于實驗1組(P＜0.01)。 2.實驗組動物的體溫、呼吸、ALT、BUN、CR、心肌酶與正常對照組、假手術組相比有顯著性差異，并且在24h-48h之間變化最大。實驗2組與實驗1組比較，呼吸、心率、體溫及外周血WBC均存在顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，尤其以外周血WBC差異更加明顯(P＜0.01)。實驗1組SIRS發(fā)生率75.4％，MODS發(fā)生率21.4％，實驗2組SIRS發(fā)生率100％，MODS發(fā)生率

5、67.9％。 3.實驗組血漿內(nèi)毒素含量明顯升高(P＜0.01或P＜0.001)，且實驗2組高于實驗1組(P＜0.01)。血漿內(nèi)毒素于術后8h開始升高，24h達高峰，在實驗1組72h接近正常；而在實驗2組72h仍維持較高水平。 4.實驗組各時相點均可見各臟器不同程度的炎性損害，實驗1組在24h-36h時相點的臟器病理變化較顯著，在48h逐漸消退，72h時相點基本恢復正常；實驗2組出血后4h即見肺臟、小腸炎性反應，12h后肺

6、、小腸、肝、腎均見非特異性炎癥反應，在24h-48h的臟器病理變化較顯著，72h仍見較明顯炎癥反應。 5.正常對照組各器官組織中有少量CD14mRNA表達，假手術組僅肺組織CD14mRNA表達較正常對照組顯著升高(P＜0.01)，實驗2組肺、小腸、肝組織CD14mRNA表達顯著升高(P＜0.01)，且隨時間進展組織CD14mRNA表達迅速升高，24h-36h達高峰，72h仍維持較高水平，且以肺臟變化最顯著(P＜0.001)。

7、 6.相關分析表明，實驗2組肺、小腸組織CD14mRNA表達與血漿內(nèi)毒素呈正相關。 結論1.大鼠尾狀核注入0.8U膠原酶加肝素法可以成功的建立腦出血致MODS模型。 2.腦出血后存在重要臟器的炎性病理改變，尤其是腸道黏膜的病理改變和肝功能障礙，為內(nèi)毒素血癥和腸道內(nèi)毒素易位的發(fā)生提供了條件。 3.腦出血后出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥，且各臟器組織內(nèi)毒素受體CD14的表達上調(diào)，提示內(nèi)毒素可能是刺激組織內(nèi)毒素受體CD14表達的重