孕酮對(duì)東莨菪堿致大鼠認(rèn)知功能障礙的影響.pdf

1、目的:術(shù)后認(rèn)知功能障礙(postoperative cognitive dysfunction，POCD)是指患者在麻醉手術(shù)后常出現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，如處理不當(dāng)，將嚴(yán)重影響患者的預(yù)后，尤以老年患者最為顯著且不易恢復(fù)。認(rèn)知功能障礙的病理生理機(jī)制尚不確切，國(guó)內(nèi)外學(xué)者主要提出了以中樞膽堿能系統(tǒng)異常、氨基酸類等神經(jīng)遞質(zhì)代謝異常、手術(shù)應(yīng)激炎癥反應(yīng)、神經(jīng)元凋亡、Aβ神經(jīng)毒性和海馬突觸可塑性的損傷等為主的假說(shuō)。POCD的病理生理機(jī)制并非是單一因素造成

2、的，而是由許多復(fù)雜因素綜合作用而成。有研究表明，POCD的發(fā)生與中樞膽堿能系統(tǒng)異常有關(guān)，抗膽堿藥物的應(yīng)用可明顯影響空間、學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能。東莨菪堿是一種外周作用較強(qiáng)的抗膽堿能藥物，將東莨菪堿注射到大鼠海馬腹側(cè)和丘腦中間背側(cè)可減少大鼠海馬內(nèi)膽堿能遞質(zhì)的含量，損害大鼠的空間、學(xué)習(xí)記憶等功能。谷氨酸(glutamate，Glu)是中樞內(nèi)典型的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyricacid，GABA)則是典型的抑制

3、性神經(jīng)遞質(zhì)，二者均可參與到學(xué)習(xí)、記憶等多種中樞神經(jīng)活動(dòng)。另有研究表明，神經(jīng)甾體孕酮(Progesterone，PROG)可通過(guò)調(diào)節(jié)中樞氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)，降低神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性毒性，從而起到神經(jīng)保護(hù)的作用。因此，本研究擬通過(guò)大鼠腹腔注射東莨菪堿，建立大鼠認(rèn)知功能障礙模型并行孕酮干預(yù)，評(píng)價(jià)孕酮對(duì)大鼠認(rèn)知功能障礙的影響。
　　方法:健康雄性SD大鼠40只，2月齡，體重130～150 g，采用隨機(jī)數(shù)字表法，將其分為4組(n=10）:鹽水

4、對(duì)照組（C組）、東莨菪堿組（S組）、孕酮干預(yù)組（S+P組）和單純?cè)型M（P組）。通過(guò)采用腹腔注射東莨菪堿(1.8mg/kg)的方法建立大鼠認(rèn)知功能障礙模型。S組腹腔注射東莨菪堿1.8 mg/kg，S+P組腹腔注射東莨菪堿1.8 mg/kg和孕酮8 mg/kg，P組腹腔注射等容量的孕酮8 mg/kg和生理鹽水，C組腹腔注射等容量的生理鹽水。4組大鼠注射藥物后即刻行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，觀察大鼠腹腔內(nèi)注射藥物前10 min(T0)及注射藥物后1h內(nèi)每1

5、0 min(T1-T6)大鼠的情緒及行為學(xué)變化，記錄周邊格和中央格跑格數(shù)、中央格停留時(shí)間、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)、修飾次數(shù)和修飾時(shí)間。于曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后第7天，行Y-型電迷宮測(cè)試，觀察大鼠的學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能的變化情況。y-型電迷宮測(cè)試完畢后即刻處死大鼠，取海馬組織，采用蘇木精-伊紅染色(HE染色)法觀察海馬組織的形態(tài)學(xué)變化，采用免疫組化法測(cè)定海馬組織GLU和GABA的含量。
　　結(jié)果:與C組比較，S組與S+P組注藥后在T1-4時(shí)點(diǎn)大鼠周邊跑

6、格數(shù)和中央格跑格數(shù)增加，中央格停留時(shí)間延長(zhǎng)，垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)增加，修飾次數(shù)減少和修飾時(shí)間縮短，第7天Y-型電迷宮測(cè)試中大鼠總訓(xùn)練次數(shù)增加，達(dá)標(biāo)時(shí)間延長(zhǎng)，Y-型電迷宮測(cè)試后大鼠海馬組織GLU含量升高，GABA含量降低，海馬組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)被破壞，邊界模糊不清，細(xì)胞核皺縮，整體細(xì)胞結(jié)構(gòu)排列松散，出現(xiàn)變性甚至壞死，其病理?yè)p傷程度加重(P＜0.05);P組上述指標(biāo)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與S組比較，S+P組注藥后在T1-4時(shí)點(diǎn)大鼠周邊

7、跑格數(shù)和中央格跑格數(shù)減少，中央格停留時(shí)間縮短，垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)減少，修飾次數(shù)增加和修飾時(shí)間延長(zhǎng)，在Y-型電迷宮測(cè)試中大鼠總訓(xùn)練次數(shù)減少，達(dá)標(biāo)時(shí)間時(shí)間縮短，Y-型電迷宮測(cè)試后大鼠海馬組織GLU含量降低，GABA含量升高，海馬組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)被破壞程度減輕，排列松散情況好轉(zhuǎn)，神經(jīng)元的變性、壞死減少，其病理?yè)p傷程度減輕(P＜0.05)。
　　結(jié)論:腹腔注射孕酮可改善東莨菪堿所致大鼠的認(rèn)知功能障礙程度，其機(jī)制可能與孕酮可調(diào)節(jié)海馬組織谷氨酸和γ