蘋果輪紋病潛伏病菌的快速檢測技術(shù)及防治藥劑篩選.pdf

1、蘋果輪紋病是蘋果的主要病害，主要危害枝干和果實，造成爛果、死枝、死樹，嚴重威脅蘋果生產(chǎn)。研究蘋果枝條內(nèi)輪紋病潛伏病菌的快速檢測技術(shù)，可為輪紋病的監(jiān)測、預(yù)測和防治藥劑的篩選提供快速的檢測方法?；瘜W(xué)防治是防治輪紋病的重要措施，評價各種藥劑對輪紋病防治效果及持效期，篩選有效的防治藥劑是輪紋病防治的基礎(chǔ)。本論文研究比較了快速檢測蘋果輪紋病潛伏病菌的四種方法，評估了7種殺菌劑對蘋果輪紋病的防治效果及持效期，為蘋果輪紋病的研究與防治提供方法。

2、>　　用分生孢子懸浮液接種表面消毒的富士蘋果當(dāng)年生枝條，取皮孔組織進行分子檢測、組織學(xué)檢測、生物學(xué)檢測，結(jié)果表明，分子檢測較為靈敏，病菌接種1周、2周和4周后，分子檢測所檢測到的皮孔帶菌率為81.7％、71.7%和80.0%，對照枝條上檢出的皮孔帶菌率最高達28.3%，表明分子檢測的假陽性率高，結(jié)果不可靠；病菌接種1到2周后，組織學(xué)方法檢測不到侵染病菌，只有在接種4周后才能檢測到侵入寄主組織內(nèi)的輪紋病菌，菌絲結(jié)構(gòu)清晰，所檢測到皮孔的帶菌

3、率為61.7%；病菌接種1周、2周和4周后，生物學(xué)方法檢測到的皮孔帶菌率為55.0%、50.0%和70.0%，對照枝條上檢測不到皮孔帶菌。冬春季節(jié)，從果園內(nèi)采集蘋果枝條，觀察皮孔的外觀形態(tài)，發(fā)現(xiàn)皮孔表面的壞死組織，外觀表現(xiàn)為小黑點，與皮孔的帶菌率具有顯著的相關(guān)性，可作為輪紋病的微觀癥狀，用于輪紋病潛伏病菌的檢測。四種檢測方法相比，分子檢測方法敏感，但可靠性差，需進一步篩選特異引物；組織學(xué)檢測較為可靠，但僅適用檢測已侵入寄主活體組織，但還

4、沒有引起可見癥狀的病菌;生物學(xué)檢測較為敏感、可靠，但受雜菌影響較大，時間較長，需進一步改進；皮孔外觀檢測方法簡便可靠，但僅適用于檢測已形成微觀癥狀的病菌，不能檢測在皮孔死組織內(nèi)潛伏的病菌。
　　采用先接種后噴藥和先噴藥后接種的方法，測定了7種殺菌劑抑制在枝條上定殖的輪紋病菌擴展致病的治療效果和保護枝條不受輪紋病菌侵染的保護效果及持效期。結(jié)果表明，吡唑醚菌酯對枝干輪紋病的治療效果最好，病菌接種1周后噴施，治療效果可達80%以上，接種

5、5周后使用，治療效果仍在50%以上；添加生石灰對吡唑醚菌酯的防治效果影響不大；其次是代森銨，病菌接種1周后噴施，治療效果可達70%以上，病菌接種3周后使用，治療效果效果仍達58%；甲基硫菌靈、戊唑醇、代森錳鋅、苯醚甲環(huán)唑和波爾多液五種藥劑的治療效果基本一致，病菌接種1周后使用，治療效果都在50-60%之間；生石灰能提高甲基硫菌靈的治療效果。7種藥劑中，甲基硫菌靈保護效果最好，施藥1周后接種，保護效果可達97%，施藥6周后接種，保護效果仍

6、達80%以上；添加生石灰對甲基硫菌靈的保護效果沒有影響；吡唑醚菌酯和波爾多液的保護效果基本一致，施藥1周后接種，保護效果都在80%以上，施藥6周后接種，保護效果仍在70%以上；代森錳鋅在施藥前期的保護效果較好，達80%以上，但3周后防治效果降至40%以下；苯醚甲環(huán)唑和代森銨的保護效果較差，施藥1周后，苯醚甲環(huán)唑的保護效果只有45%。
　　輪紋病瘤是病原菌致病過程和寄主抗性的綜合表現(xiàn)，為了了解輪紋病菌的周年擴展動態(tài)和寄主的周年抗性變

7、化，確定治療病瘤的關(guān)鍵時期，本論文監(jiān)測了病瘤內(nèi)輪紋病菌的生長擴展動態(tài)和寄主的抗病表現(xiàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，6月份接種形成的病瘤，11月份病瘤內(nèi)已形成阻止病菌擴展的次生木栓層，但木栓層的形成并沒有完全阻止輪紋病菌的生長擴展，冬春季節(jié)病瘤內(nèi)輪紋病菌在次生木栓層外仍繼續(xù)生長擴展，并形成較細的擴展菌絲在寄主皮層的細胞間隙生長擴展，次年3月份菌絲外圍寄主皮層細胞的細胞壁發(fā)亮，可能與細胞壁木栓化有關(guān)，有關(guān)病瘤內(nèi)菌絲的生長擴展動態(tài)和寄主的抗性變化仍需繼續(xù)監(jiān)測。