蘋(píng)果輪紋病潛伏病菌的快速檢測(cè)技術(shù)及防治藥劑篩選.pdf

1、蘋(píng)果輪紋病是蘋(píng)果的主要病害，主要危害枝干和果實(shí)，造成爛果、死枝、死樹(shù)，嚴(yán)重威脅蘋(píng)果生產(chǎn)。研究蘋(píng)果枝條內(nèi)輪紋病潛伏病菌的快速檢測(cè)技術(shù)，可為輪紋病的監(jiān)測(cè)、預(yù)測(cè)和防治藥劑的篩選提供快速的檢測(cè)方法。化學(xué)防治是防治輪紋病的重要措施，評(píng)價(jià)各種藥劑對(duì)輪紋病防治效果及持效期，篩選有效的防治藥劑是輪紋病防治的基礎(chǔ)。本論文研究比較了快速檢測(cè)蘋(píng)果輪紋病潛伏病菌的四種方法，評(píng)估了7種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果輪紋病的防治效果及持效期，為蘋(píng)果輪紋病的研究與防治提供方法。

2、>　　用分生孢子懸浮液接種表面消毒的富士蘋(píng)果當(dāng)年生枝條，取皮孔組織進(jìn)行分子檢測(cè)、組織學(xué)檢測(cè)、生物學(xué)檢測(cè)，結(jié)果表明，分子檢測(cè)較為靈敏，病菌接種1周、2周和4周后，分子檢測(cè)所檢測(cè)到的皮孔帶菌率為81.7％、71.7%和80.0%，對(duì)照枝條上檢出的皮孔帶菌率最高達(dá)28.3%，表明分子檢測(cè)的假陽(yáng)性率高，結(jié)果不可靠；病菌接種1到2周后，組織學(xué)方法檢測(cè)不到侵染病菌，只有在接種4周后才能檢測(cè)到侵入寄主組織內(nèi)的輪紋病菌，菌絲結(jié)構(gòu)清晰，所檢測(cè)到皮孔的帶菌

3、率為61.7%；病菌接種1周、2周和4周后，生物學(xué)方法檢測(cè)到的皮孔帶菌率為55.0%、50.0%和70.0%，對(duì)照枝條上檢測(cè)不到皮孔帶菌。冬春季節(jié)，從果園內(nèi)采集蘋(píng)果枝條，觀察皮孔的外觀形態(tài)，發(fā)現(xiàn)皮孔表面的壞死組織，外觀表現(xiàn)為小黑點(diǎn)，與皮孔的帶菌率具有顯著的相關(guān)性，可作為輪紋病的微觀癥狀，用于輪紋病潛伏病菌的檢測(cè)。四種檢測(cè)方法相比，分子檢測(cè)方法敏感，但可靠性差，需進(jìn)一步篩選特異引物；組織學(xué)檢測(cè)較為可靠，但僅適用檢測(cè)已侵入寄主活體組織，但還

4、沒(méi)有引起可見(jiàn)癥狀的病菌;生物學(xué)檢測(cè)較為敏感、可靠，但受雜菌影響較大，時(shí)間較長(zhǎng)，需進(jìn)一步改進(jìn)；皮孔外觀檢測(cè)方法簡(jiǎn)便可靠，但僅適用于檢測(cè)已形成微觀癥狀的病菌，不能檢測(cè)在皮孔死組織內(nèi)潛伏的病菌。
　　采用先接種后噴藥和先噴藥后接種的方法，測(cè)定了7種殺菌劑抑制在枝條上定殖的輪紋病菌擴(kuò)展致病的治療效果和保護(hù)枝條不受輪紋病菌侵染的保護(hù)效果及持效期。結(jié)果表明，吡唑醚菌酯對(duì)枝干輪紋病的治療效果最好，病菌接種1周后噴施，治療效果可達(dá)80%以上，接種

5、5周后使用，治療效果仍在50%以上；添加生石灰對(duì)吡唑醚菌酯的防治效果影響不大；其次是代森銨，病菌接種1周后噴施，治療效果可達(dá)70%以上，病菌接種3周后使用，治療效果效果仍達(dá)58%；甲基硫菌靈、戊唑醇、代森錳鋅、苯醚甲環(huán)唑和波爾多液五種藥劑的治療效果基本一致，病菌接種1周后使用，治療效果都在50-60%之間；生石灰能提高甲基硫菌靈的治療效果。7種藥劑中，甲基硫菌靈保護(hù)效果最好，施藥1周后接種，保護(hù)效果可達(dá)97%，施藥6周后接種，保護(hù)效果仍

6、達(dá)80%以上；添加生石灰對(duì)甲基硫菌靈的保護(hù)效果沒(méi)有影響；吡唑醚菌酯和波爾多液的保護(hù)效果基本一致，施藥1周后接種，保護(hù)效果都在80%以上，施藥6周后接種，保護(hù)效果仍在70%以上；代森錳鋅在施藥前期的保護(hù)效果較好，達(dá)80%以上，但3周后防治效果降至40%以下；苯醚甲環(huán)唑和代森銨的保護(hù)效果較差，施藥1周后，苯醚甲環(huán)唑的保護(hù)效果只有45%。
　　輪紋病瘤是病原菌致病過(guò)程和寄主抗性的綜合表現(xiàn)，為了了解輪紋病菌的周年擴(kuò)展動(dòng)態(tài)和寄主的周年抗性變

7、化，確定治療病瘤的關(guān)鍵時(shí)期，本論文監(jiān)測(cè)了病瘤內(nèi)輪紋病菌的生長(zhǎng)擴(kuò)展動(dòng)態(tài)和寄主的抗病表現(xiàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，6月份接種形成的病瘤，11月份病瘤內(nèi)已形成阻止病菌擴(kuò)展的次生木栓層，但木栓層的形成并沒(méi)有完全阻止輪紋病菌的生長(zhǎng)擴(kuò)展，冬春季節(jié)病瘤內(nèi)輪紋病菌在次生木栓層外仍繼續(xù)生長(zhǎng)擴(kuò)展，并形成較細(xì)的擴(kuò)展菌絲在寄主皮層的細(xì)胞間隙生長(zhǎng)擴(kuò)展，次年3月份菌絲外圍寄主皮層細(xì)胞的細(xì)胞壁發(fā)亮，可能與細(xì)胞壁木栓化有關(guān)，有關(guān)病瘤內(nèi)菌絲的生長(zhǎng)擴(kuò)展動(dòng)態(tài)和寄主的抗性變化仍需繼續(xù)監(jiān)測(cè)。