我國(guó)白紋伊蚊對(duì)擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑的敏感性檢測(cè)與抗性機(jī)制研究.pdf

1、白紋伊蚊Aedes albopictus Skuse，1894，隸屬伊蚊屬(Aedes）、覆蚊亞屬(Stegomyia)，起源于東南亞，目前已廣泛分布于全球的熱帶、亞熱帶和溫帶地區(qū)。白紋伊蚊在中國(guó)的分布也十分廣泛，可以傳播登革熱、黃熱病、基孔肯雅熱及寨卡病毒病等，造成了嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。自上世紀(jì)80年代起，菊酯類殺蟲(chóng)劑因其高效、低毒和易于分解等特點(diǎn)成為應(yīng)用廣泛、用量最多的衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑。而這也導(dǎo)致中國(guó)多地白紋伊蚊種群對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了不

2、同水平的抗藥性，為蟲(chóng)媒傳染病的防控提出了挑戰(zhàn)。
　　本課題的研究策略是:首先建立中國(guó)白紋伊蚊成蚊對(duì)4種菊酯類殺蟲(chóng)劑抗性生物測(cè)定的診斷劑量，應(yīng)用建立的診斷劑量測(cè)定現(xiàn)場(chǎng)白紋伊蚊種群對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑的敏感性;對(duì)應(yīng)生物測(cè)定的樣本測(cè)定其代謝解毒酶的活性和kdr基因突變的情況，綜合分析與抗藥性的相互關(guān)系;連續(xù)2年測(cè)定海南省海口市常用市售殺蟲(chóng)劑商品對(duì)當(dāng)?shù)匕准y伊蚊成蚊的效果。取得以下主要結(jié)果:
　　1.中國(guó)白紋伊蚊成蚊對(duì)溴氰菊酯、氯菊酯、高效

3、氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的LC50值分別為0.0062％，0.0501％，0.0064％和0.0140％，LC99值分別為0.0518％，0.5317％，0.1200％和0.1186％，相對(duì)應(yīng)的診斷劑量為0.1036％，1.0634％，0.2400％和0.2372％。
　　2.應(yīng)用建立的診斷劑量，接觸筒法測(cè)定了山東濟(jì)南、浙江杭州、上海寶山、上海楊浦和海南?？诂F(xiàn)場(chǎng)種群白紋伊蚊對(duì)溴氰菊酯、氯菊酯、高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的敏感性，

4、死亡率分別為6.98％～76.60％、40.82％～85.23％、27.84％～71.58％和38.30％～64.77％，所有種群對(duì)4種殺蟲(chóng)劑均已產(chǎn)生抗性。總體的趨勢(shì)是，海南?？诜N群對(duì)4種殺蟲(chóng)劑的抗性水平最高，其次是山東濟(jì)南和浙江杭州種群，上海的寶山和楊浦兩個(gè)種群相對(duì)較低。
　　3.本研究測(cè)定了白紋伊蚊實(shí)驗(yàn)室敏感品系和現(xiàn)場(chǎng)抗性種群的GST和MFO活性，建立了基線，并對(duì)應(yīng)測(cè)定了生物測(cè)定為抗性和敏感表型樣本的GST和MFO的活性進(jìn)行比

5、較，遺憾的是未發(fā)現(xiàn)可循的規(guī)律，提示GST和MFO在不同抗性種群中的作用可能不同。但接觸氯菊酯后抗性組和敏感組GST和MFO活性的R/S均大于1，提示GST和MFO僅與氯菊酯抗性產(chǎn)生密切相關(guān)。
　　4.本研究還對(duì)應(yīng)檢測(cè)了生物測(cè)定樣本的kdr突變情況，在5個(gè)現(xiàn)場(chǎng)抗性種群629個(gè)樣本中，發(fā)現(xiàn)有1532和1534兩個(gè)位點(diǎn)分別存在突變，并且在寶山和楊浦種群中發(fā)現(xiàn)了24個(gè)1532和1534位點(diǎn)同時(shí)突變的個(gè)體。1532位點(diǎn)存在2種等位基因，即野

6、生型ATC/I(94.67％)和突變型ACC/T(5.33％);3種基因型，即野生型純合子I/I(89.82％)、野生/突變型雜合子I/T(9.54％)和突變型純合子T/T(0.64％);1534位點(diǎn)共存在4種等位基因，即野生型TTC/F(53.10％)，突變型TCC/S(44.20％)、TTA/L(1.83％)和TGC/C(0.87％);7種基因型，即野生型純合子F/F(37.52％)、野生/突變型雜合子F/S(28.30％)、F/L

7、(2.38％)和F/C(0.48％)，突變型純合子S/S(29.41％)、L/L(0.64％)和雜合子S/C(1.27％)。本研究首次記錄了中國(guó)白紋伊蚊種群在1532位點(diǎn)存在突變I1532T，發(fā)現(xiàn)了1534位點(diǎn)新的突變等位基因TTA/L以及一個(gè)個(gè)體存在1532和1534位點(diǎn)同時(shí)突變的情況。分析kdr各種突變類型與抗性表型的關(guān)系，結(jié)果顯示I1532T與白紋伊蚊對(duì)溴氰菊酯的抗性形成呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)1534S與白紋伊蚊對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑的抗性形成呈正

8、相關(guān)。
　　5.綜合分析本研究白紋伊蚊對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑抗性產(chǎn)生的機(jī)制，發(fā)現(xiàn)單一機(jī)制不能完全解釋，應(yīng)是多種機(jī)制共同作用的結(jié)果。對(duì)于不同的殺蟲(chóng)劑，氯菊酯抗性產(chǎn)生的機(jī)制中擊倒抗性機(jī)制貢獻(xiàn)率大于代謝機(jī)制，溴氰菊酯則是代謝機(jī)制與擊倒抗性機(jī)制共同作用的結(jié)果。對(duì)于不同的種群，由于抗性的水平和發(fā)展進(jìn)程不同，則種群間的代謝機(jī)制與擊倒抗性機(jī)制的貢獻(xiàn)率不同，但發(fā)現(xiàn)兩者是相互補(bǔ)充，共同應(yīng)對(duì)殺蟲(chóng)劑。
　　6.2016年和2017年連續(xù)兩年應(yīng)用玻璃藥膜法

9、測(cè)定海南省?？谑谐Ｓ檬惺蹥⑾x(chóng)劑對(duì)當(dāng)?shù)匕准y伊蚊種群的效果。結(jié)果顯示該地白紋伊蚊種群已對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了廣泛的抗藥性，導(dǎo)致單一成分的菊酯類殺蟲(chóng)劑的殺蟲(chóng)效果不顯著，尤其是溴氰菊酯，與接觸筒法的測(cè)定結(jié)果一致，而混配成分的殺蟲(chóng)劑殺蟲(chóng)效果均顯著。
　　本研究建立的白紋伊蚊對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑抗藥性的診斷劑量，可為檢測(cè)和監(jiān)測(cè)中國(guó)白紋伊蚊種群對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑抗性提供必要的參考數(shù)據(jù);通過(guò)檢測(cè)現(xiàn)場(chǎng)白紋伊蚊種群對(duì)菊酯類殺蟲(chóng)劑的敏感性，完善了中國(guó)白紋伊蚊成蚊的