家蠶蛹期Hgh-like蛋白的純化和鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、人生長激素(Human Growm Hormone,hGH)是一種多肽類激素,由人腦垂體前葉嗜酸性細胞分泌,是一種非糖基化的親水性單鏈球蛋白。hGH通過與細胞膜表面的hGH受體結合行使其生物學功能,促進蛋白質合成和組織生長、調節(jié)新陳代謝和機體免疫功能,是人體多種代謝途徑的重要調節(jié)因子,在人體內起著重要作用。我們在家蠶蛹期蛋白中發(fā)現(xiàn)一種能與hGH抗體結合的天然蛋白,其表觀分子量約為30kD,并通過Western Blotting檢測和免疫

2、沉淀的方法確認該蛋白的存在,將其命名為hGH-like蛋白。本課題主要研究家蠶蛹期蛋白中hGH-like蛋白的分離純化和鑒定,并為進一步研究該蛋白的結構和生物學功能奠定基礎。
   本文以家蠶蛹凍干粉為原料,經過勻漿、過濾、離心、硫酸銨分段沉淀、超濾對家蠶蛹蛋白進行初步分離,然后經脫鹽、凍干進行濃縮和保存。經過初步分離的蛋白樣品采用免疫沉淀、親和層析的方法進一步純化。再經過雙向電泳進一步分離后,進行MALDI-TOF質譜分析獲得

3、該蛋白的肽質量指紋圖譜(Peptide Mass Fingerprinting,PMF),利用PLGS Browser搜索家蠶蛋白質理論數(shù)據(jù)庫分析鑒定純化出的蛋白質,搜索結果有三個蛋白有可能是hGH-like蛋白或與其有相互作用的蛋白,在西南農大家蠶理論蛋白庫中的編號分別為Bmb019519、Bmb021419和Bmb027808。 鑒于hGH的重要生物學功能和家蠶完全變態(tài)生長的特點,家蠶蛹中hGH-like蛋白的研究或具有重要的生物學

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