2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩84頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、在生命活動中膜蛋白承擔著不可替代的生物學功能,成為許多分子藥物作用時的主要靶點,但由于其自身具有的一些特性,天然膜蛋白的分離和純化成為目前最大的難題。目前融合標簽技術(shù)已被廣泛的應(yīng)用于研究膜蛋白的晶體結(jié)構(gòu)和生物功能之中。膜蛋白基因家族MMgT于2007年在非洲蟾蜍的卵母細胞中被首次鑒定,進一步研究發(fā)現(xiàn)該家族是轉(zhuǎn)運鎂離子的蛋白家族之一。但家蠶中是否存在MMgT膜蛋白尚未見相關(guān)報道。
   本研究從家蠶蠶蛹cDNA文庫中,獲得一條與M

2、g2+轉(zhuǎn)運相關(guān)的膜蛋白基因,命名為BmMMgT,生物信息學分析表明該蛋白是一個單次跨膜蛋白。為了研究BmMMgT在家蠶中的功能,首先利用DNA重組技術(shù)將BmMMgT基因克隆至原核表達載體pET-32a(+)中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后融合蛋白得到了高效表達,表達產(chǎn)物經(jīng)鎳離子親和層析柱和陰離子交換柱純化得到純度較高的融合蛋白,質(zhì)譜鑒定的結(jié)果表明該蛋白為目的蛋白。接著用純化的融合蛋白為抗原,免疫新西蘭兔制備多克隆抗體,經(jīng)間接ELISA法測定其效價達

3、1∶25600以上。同時利用載體上的凝血酶酶切位點,純化出了無標簽的膜蛋白BmMMgT。為了解析膜蛋白BmMMgT的三維結(jié)構(gòu),本研究不僅對該膜蛋白的結(jié)晶條件進行了篩選,同時也對該膜蛋白與本實驗室已經(jīng)解結(jié)構(gòu)的Mn-SOD融合表達的蛋白進行了結(jié)晶條件的初篩。進一步利用His-tagpulldown技術(shù)研究了膜蛋白BmMMgT與蠶蛹粉全蛋白相互作用的分析,質(zhì)譜鑒定結(jié)果表明釣出的該蛋白可能是家蠶神經(jīng)肽前體(orcokninprecursor)。

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論