抑癌基因PTEN在乳腺癌及癌前病變中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　本研究通過免疫組織化學(xué)、Western blot、熒光定量PCR技術(shù)檢測乳腺導(dǎo)管上皮不典型增生（ADH）、導(dǎo)管內(nèi)癌（DCIS）和浸潤性導(dǎo)管癌（IDC）三組病變組織中PTEN基因在mRNA以及蛋白水平的表達(dá)情況，并對臨床病理隨訪資料進(jìn)行相關(guān)性分析，旨在探討以下問題：
　　1.探討PTEN在ADH、DCIS、IDC三組病變組織中的表達(dá)及其在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的意義。
　　2.分析 PTEN的表達(dá)與乳腺癌患者發(fā)

2、病年齡、病理學(xué)分級、腫瘤直徑、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期的關(guān)系。
　　3.探討 PTEN表達(dá)與雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、原癌基因（HER-2）、p53、EGFR、K i-67的關(guān)系。
　　材料與方法：
　　1、收集2001年1月至2013年12月廣東省婦幼保健院乳腺防治中心行手術(shù)治療并經(jīng)病理確診的病例，其中導(dǎo)管上皮不典型增生60例，導(dǎo)管內(nèi)癌100例，浸潤性導(dǎo)管癌165例，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)（IHC）

3、檢測（S-P法）各組乳腺病變中PTEN蛋白的表達(dá)情況。
　　2、利用Western blot方法進(jìn)一步檢測ADH、DCIS、IDC三組乳腺病變組織中PTEN蛋白的表達(dá)情況，進(jìn)而與免疫組化結(jié)果相互印證。
　　3、利用real-time RT-PCR檢測ADH、DCIS、IDC三組乳腺病變組織中PTEN基因在mRNA水平的表達(dá)情況；
　　4、分析PTEN蛋白表達(dá)水平與乳腺癌患者年齡、腫瘤直徑及分化程度以及轉(zhuǎn)移之間的相關(guān)性；

4、
　　5、分析 P TEN表達(dá)與雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、原癌基因（HER-2）、p53、EGFR、Ki-67的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1、分別在ADH、DCIS、IDC三組病變組織中運(yùn)用免疫組化技術(shù)檢測PTEN的表達(dá)，結(jié)果顯示 PTEN蛋白在三組病變組織中的陽性表達(dá)率分別為91.9％、48.9%、36.9%，呈逐漸下降趨勢，三組間PTEN蛋白的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（?2=54.734，P<0.001）。

5、
　　2、用Western-Blot技術(shù)檢測PTEN蛋白在乳腺ADH、DCIS、IDC三組病變組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示PTEN蛋白在ADH組表達(dá)最高，DCIS組次之， IDC組最低，PTEN蛋白從ADH、DCIS、IDC三組病變組織中的表達(dá)逐級遞減趨勢，三組病變組織間PTEN蛋白表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（?=9.355，P<0.001）。
　　3、用real-time RT-PCR技術(shù)檢測ADH、DCIS、IDC三組乳腺病變組

6、織中PTEN基因在mRNA水平的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，ADH組PTEN mRNA表達(dá)水平最高，DCIS組次之，IDC組最低。PTEN mRNA在ADH、DCIS、IDC三組病變組織中的表達(dá)逐級遞減趨勢（?=26.661，P<0.001），與其在蛋白水平的表達(dá)趨勢相一致。
　　4、通過免疫組化結(jié)果與患者臨床資料進(jìn)行相關(guān)性分析顯示，年齡與PTEN蛋白表達(dá)水平無相關(guān)。PTEN蛋白表達(dá)水平與患者的腫瘤分化程度、臨床分級相關(guān)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義（?2=15.8，P<0.001）。
　　5、PTEN蛋白的表達(dá)與ER（?2=31.116，P<0.001）、PR（?2=15.137，P<0.001）、HER-2（?2=12.099，P<0.001）、K i-67(?2=58.409，P<0.001)、P53（?2=9.922， P<0.001）及EGF R（?2=11.188，P<0.001）相關(guān)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論
　　1、無論是在蛋白水平還是 mRNA