TLR2和TLR4在同種心臟移植免疫中的作用研究.pdf

1、目的：建立大鼠同種異體腹腔異位心臟移植模型，探討TLR2、TLR4及其相關(guān)通路在心臟移植排斥反應(yīng)中的作用。
　　 方法：將供體Wistar大鼠及受體SD大鼠隨機(jī)分成兩組，A組(移植前)：在行Wistar大鼠到SD大鼠腹腔異位心臟移植前，抽取SD大鼠外周血，分離出單個(gè)核細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞；B組(移植后)：行Wistar大鼠到SD大鼠腹腔異位心臟移植，待左心室收縮停止時(shí)，即移植反應(yīng)排斥達(dá)高峰時(shí)間，抽取受體SD外周血，分離出單個(gè)

2、核細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。觀測(cè)指標(biāo)：半定量PCR和熒光定量real-time PCR檢測(cè)單個(gè)核細(xì)胞的TLR2、TLR4、MyD88、TRIF6、NF-κ B p65的mRNA表達(dá)情況；ELISA法檢測(cè)外周血中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)檢測(cè)單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞表面的共刺激分子CD80、CD86分子。
　　 結(jié)果：(1)TLR2、TLR4、MyD88、TRIF6和NF-κB p65的mRNA表達(dá)水平

3、：B組TLR2、TLR4及其下游的MyD88、TRIF6和NF-κB p65的mRNA水平較A組明顯升高(p<0.05)。(2)外周血TNF-α(pg/ml)：A組的平均值為11.06±2.21，B組的平均值為440.56±37.59，B組TNF-α含量明顯高于A組(P<0.05)。(3)外周血IFN-γ(pg/m1)：A組的平均值為4.52±0.48，B組的平均值為488.70±22.13，B組IFN-γ含量明顯高于A組(P<0.05

4、)。(4)外周血IL-2(pg/na)：A組的平均值為0.77±0.03，B組的平均值為4.67±0.04，B組IL-2含量明顯高于A組(P<0.05)。(5)外周血IL-10(pg/ml)：A組的平均值為19.97±1.70，B組的平均值為45.45±1.58，B組IL-10含量明顯高于A組(P<0.05)。(6)單核細(xì)胞表面的CD80表達(dá)(％)：A組的平均值為5.08±2.05，B組的平均值為33.68±7.57，B組CD80表達(dá)明

5、顯高于A組(P<0.05)。(7)單核細(xì)胞表面的CD86表達(dá)(％)：A組的平均值為7.52±5.73，B組的平均值為35.02±5.65，B組CD86表達(dá)明顯高于A組(P<0.05)。(8)淋巴細(xì)胞表面的CD80表達(dá)(％)：A組的平均值為4.46±2.84，B組的平均值為34.44±7.22，B組CD80表達(dá)明顯高于A組(P<0.05)。(9)淋巴細(xì)胞表面的CD86表達(dá)(％)：A組的平均值為9.65±6.46，B組的平均值為36.80±