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文檔簡介
1、斷奶仔豬日糧添加高劑量氧化鋅可抑制腹瀉,促進生長,但其作用機制尚不甚清楚,且長期添加高鋅反抑制生長,導(dǎo)致糞中鋅的排放量增加,污染環(huán)境。因此,高鋅作用機制及其替代物的研究已受到高度關(guān)注。
本課題通過體外實驗比較研究了氧化鋅與硫酸鋅對巨噬細胞(RAW264.7)免疫功能、大腸桿菌K88生長及IPEC-J2細胞緊密連接的影響。在此基礎(chǔ)上通過動物實驗驗證了包膜氧化鋅防止氧化鋅在仔豬胃內(nèi)成為鋅離子的效果,并研究了包膜氧化鋅對斷奶仔豬
2、的抗腹瀉促生長作用,為氧化鋅的深入研究及包膜氧化鋅的推廣應(yīng)用提供科學依據(jù)。
主要研究結(jié)果如下:
1.體外實驗
(1)細胞培養(yǎng)液中添加60μmol/L氧化鋅時可改變RAW264.7細胞及IPEC-J2細胞的形態(tài),增加細胞死亡率,提高培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶活性,而添加3-30μmol/L氧化鋅及60μmol/L硫酸鋅對巨噬細胞、IPEC-J2細胞無顯著影響。
(2)培養(yǎng)液中添加3-30μm
3、ol/L氧化鋅及30μmol/L硫酸鋅對LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)無明顯的抑制作用;15μmol/L氧化鋅處理巨噬細胞24小時及48小時可顯著增強巨噬細胞的吞噬活性。
(3)氧化鋅對大腸桿菌K88有很強的抗菌效果,其抗菌效果隨著氧化鋅的添加量增加而增強,在0.8μg/ml時可殺滅大腸桿菌K88。其抗菌機制為氧化鋅破壞菌體細胞膜,導(dǎo)致其細胞內(nèi)容物外泄,進而殺滅細菌。
(4)細胞培養(yǎng)液中添加15和30μmol/L氧化鋅
4、可顯著增加IPEC-J2細胞緊密連接蛋白Occludin與ZO-1的基因與蛋白表達量。
(5)硫酸鋅對巨噬細胞的免疫功能、大腸桿菌K88的生長及IPEC-J2細胞上的緊密連接蛋白均無顯著影響。
由體外實驗可知氧化鋅而非硫酸鋅或鋅離子具有調(diào)節(jié)巨噬細胞免疫功能、抑制細菌生長、保護腸上皮屏障的功能。
2.動物實驗
2.1氧化鋅與包膜氧化鋅在胃腸道內(nèi)的穩(wěn)定性
日糧中添加的氧化
5、鋅在仔豬胃內(nèi)可成為鋅離子并使胃腸道內(nèi)pH值升高,而包膜氧化鋅可有效防止胃液對氧化鋅的酸化,并在腸道內(nèi)逐漸釋放氧化鋅。4.0小時后空腸、回腸內(nèi)氧化鋅的釋放率分別為89.34%及86.33%。
2.2包膜氧化鋅對仔豬斷奶早期的抗腹瀉效果(0-7天)
90頭斷奶仔豬隨機分為三組,分別飼喂基礎(chǔ)日糧(對照組),基礎(chǔ)日糧+1500mg/kg包膜氧化鋅(包膜氧化鋅組)和3000 mg/kg氧化鋅(氧化鋅組),試驗期7天。結(jié)
6、果表明,包膜氧化鋅和氧化鋅均有增加仔豬平均日增重的趨勢(P=0.062),并顯著降低仔豬腹瀉率(P<0.01),提高血清中免疫球蛋白及血清鋅的含量(P<0.01)。同時包膜氧化鋅組與氧化鋅組中仔豬血清中胰島素樣生長因子-I(IGF-I)、肝臟中IGF-I的基因表達量、空腸中緊密連接蛋白ZO-1的基因表達量均顯著升高,包膜氧化鋅組與氧化鋅組之間無顯著差異(P>0.05)。但與氧化鋅組相比,添加1500mg/kg包膜氧化鋅可顯著降低糞樣鋅的
7、含量(P<0.01)。
2.3包膜氧化鋅對斷奶仔豬的促生長作用(0-21天)
144頭斷奶仔豬隨機分為6組,分別飼喂基礎(chǔ)日糧添加0(對照組)、281.25、562.5、1125、2250mg/kg包膜氧化鋅及2250mg/kg氧化鋅(氧化鋅組)。試驗期21天。結(jié)果表明:
(1)日糧中添加包膜氧化鋅(562.5、1125、2250mg/kg)和2250 mg/kg氧化鋅均可顯著提高仔豬平均日增重(
8、P<0.05),降低料重比(P<0.05),并且降低仔豬腹瀉率(P<0.05)。這些效果在包膜氧化鋅組(≥562.5mg/kg)和氧化鋅組中無顯著差異(P>0.05)。與氧化鋅組相比,日糧中添加281.25-1125mg/kg包膜氧化鋅可顯著降低糞樣中的鋅殘留.仔豬日糧中包膜氧化鋅的適宜添加量為562.5mg/kg。
(2)日糧中添加包膜氧化鋅及氧化鋅對仔豬器官相對重量無顯著影響(P>0.05),但有提高血清中免疫球蛋白I
9、gG的趨勢(P=0.09),可以顯著增加空腸、回腸黏膜中免疫球蛋白IgA的含量(P<0.05),顯著提高肝臟、空腸、回腸中T-AOC酶的活性,降低空腸中MDA的含量(P<0.05),同時增加血清中TGF-β的含量,增強十二指腸、空腸中TGF-β的基因表達(P<0.05)。
(3)日糧中添加包膜氧化鋅可顯著降低血清中D-乳酸及內(nèi)毒素的含量(P<0.05),同時提高十二指腸絨毛高度(P<0.05),增強緊密連接蛋白相關(guān)基因的表
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