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文檔簡(jiǎn)介
1、本課題以21日齡斷奶仔豬為試驗(yàn)對(duì)象,研究了納米氧化鋅(Nano-Zinc Oxide)對(duì)斷奶仔豬腹瀉率和腸黏膜屏障功能的影響,探討其對(duì)腸黏膜屏障保護(hù)作用的機(jī)理,為納米氧化鋅在生產(chǎn)中應(yīng)用提供理論依據(jù)。以雄性SD大鼠為研究對(duì)象,用脂多糖(LPS)建立腸損傷模型,在尤斯灌流室(Ussing chamber)中研究納米氧化鋅對(duì)SD大鼠腸道電生理的影響。
斷奶仔豬飼養(yǎng)試驗(yàn)選用108頭21日齡平均體重為5.8±0.2 kg的斷奶“杜×
2、長(zhǎng)×大”三元雜交仔豬,斷奶后按胎次一致、體重相近、公母各半的分組方法,采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)共設(shè)3組,分別為對(duì)照組、3000 mg/kg氧化鋅組和300 mg/kg納米氧化鋅組。試驗(yàn)仔豬采用群飼,自由采食和飲水。正試期14天,試驗(yàn)前對(duì)豬舍進(jìn)行全面清洗和消毒。試驗(yàn)期間每日記錄飼料消耗量,統(tǒng)計(jì)腹瀉和死亡情況,第7 d和14 d采集糞便、血樣等。試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí),禁食(自由飲水)12 h,稱重,計(jì)算日增重、日采食量、料重比等。
SD大
3、鼠試驗(yàn)選取成年、健康、體重200-250 g雄性SD大鼠45只,隨機(jī)分為3組,靜脈注射5 mg/kg BW脂多糖(LPS)構(gòu)建腸損傷模型。取其小腸黏膜在尤斯灌流室(Ussing chamber)中測(cè)定SD大鼠腸道電生理指標(biāo)。在腸道黏膜的黏膜端和漿膜端分別添加氧化鋅溶液、納米氧化鋅溶液和5-羥色胺(5-HT)溶液,研究納米氧化鋅對(duì)SD大鼠腸道電生理的影響。
試驗(yàn)結(jié)果表明:
1.生長(zhǎng)性能:和對(duì)照組相比,試驗(yàn)組末重
4、分別提高了1.87%和3.74%,差異不顯著(P<0.05);納米氧化鋅組末重比氧化鋅組末重提高了1.83%,差異不顯著(P<0.05)。試驗(yàn)組日增重分別比對(duì)照組提高了5.52%和7.26%,差異顯著(P<0.05)。日采食量試驗(yàn)組和對(duì)照組相比有所增加,分別增加了3.14%和4.25%,差異均不顯著(P>0.05)。和對(duì)照組相比,氧化鋅組和納米氧化鋅組料重比有所下降,分別下降了1.91%和2.54%,差異均不顯著(P<0.05);氧化鋅
5、組和納米氧化鋅組相比差異也不顯著(P>0.05)。
2.腹瀉率:仔豬腹瀉率在斷奶后第三天達(dá)到高峰,隨后逐漸降低。在整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi),兩組試驗(yàn)組的腹瀉率均顯著(P<0.05)低于對(duì)照組,在斷奶后第三天試驗(yàn)組和對(duì)照組的腹瀉率差異最大。整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi),氧化鋅組腹瀉率高于納米氧化鋅組,差異不顯著(P>0.05),提示斷奶引起了仔豬嚴(yán)重的腹瀉;3000 mg/kg氧化鋅和300 mg/kg納米氧化鋅對(duì)斷奶后腹瀉有較好的抑制作用;3000
6、mg/kg氧化鋅和300 mg/kg納米氧化鋅的作用效果無(wú)顯著差異。
3.血清皮質(zhì)醇:與對(duì)照組相比,在斷奶后第7天(D7)和斷奶后第14天(D14)試驗(yàn)組血清皮質(zhì)醇含量顯著(P<0.05)降低。斷奶后第7天(D7)和斷奶后第14天(D14)氧化鋅組和納米氧化鋅組之間血清皮質(zhì)醇含量差異均不顯著(P>0.05)。
4.前炎癥細(xì)胞因子:與對(duì)照組相比,在斷奶后第7天(D7)和斷奶后第14天(D14)試驗(yàn)組血清IL-1
7、β含量顯著(P<0.05)降低。斷奶后第7天(D7)和斷奶后第14天(D14)氧化鋅組比納米氧化鋅組血清IL-1β含量高9.1%和10.5%,差異均不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比,在斷奶后第7天(D7)和斷奶后第14天(D14)試驗(yàn)組血清IL-6含量均顯著(P<0.05)降低。斷奶后第7天(D7)和斷奶后第14天(D14)氧化鋅組比納米氧化鋅組血清IL-6含量高5.2%和4.1%,差異均不顯著(P>0.05)。
5.
8、糞便大腸桿菌菌落數(shù):在斷奶后第7天,氧化鋅組糞便大腸桿菌菌落數(shù)比對(duì)照組降低1.9%,差異不顯著(P>0.05);納米氧化鋅組糞便大腸桿菌比對(duì)照組降低5.8%,差異顯著(P<0.05)。在斷奶后第14天,氧化鋅組糞便大腸桿菌落數(shù)比對(duì)照組降低3.8%,差異不顯著(P>0.05);納米氧化鋅組糞便大腸桿菌菌落數(shù)比對(duì)照組降低7.2%,差異顯著(P<0.05)。提示納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬糞便大腸桿菌具有抑制作用。
6.SD大鼠小腸基礎(chǔ)
9、電生理指標(biāo):試驗(yàn)組1(LPS組)跨膜電阻與空白組差異顯著(P<0.05),試驗(yàn)組2(LPS+納米氧化鋅組)與空白組和試驗(yàn)組1差異均不顯著(P>0.05),試驗(yàn)組2跨膜電阻比試驗(yàn)組1高17.9%,比空白組低11.0%,提示LPS破壞了SD大鼠小腸黏膜,添加納米氧化鋅對(duì)LPS造成的小腸黏膜的破壞具有一定的保護(hù)作用。試驗(yàn)組1基礎(chǔ)短路電流與空白組和試驗(yàn)組2相比均差異顯著(P<0.05),而試驗(yàn)組2和空白組相比差異不顯著(P>0.05)。提示脂多
10、糖的添加破壞了大鼠的腸黏膜屏障,而納米氧化鋅對(duì)此破壞具有保護(hù)作用。
7.小腸短路電流:空白組S-NanoZn處理造成的短路電流的變化顯著(P<0.05)大于M-Zn處理和S-Zn處理,在試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組2中也有相同的趨勢(shì)??瞻捉M中M-Zn處理、S-Zn處理和M-NanoZn處理間差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)組1中S-NanoZn處理造成的短路電流的變化顯著(P<0.05)大于其他處理,且S-Zn處理和M-NanoZn處
11、理的△Isc顯著(P<0.05)大于M-Zn處理。試驗(yàn)組2與試驗(yàn)組1類似,S-NanoZn處理造成的△Isc顯著(P<0.05)大于其他處理,其中S-Zn處理和M-NanoZn處理的△Isc顯著(P<0.05)大于M-Zn處理。
8.5-羥色胺(5-HT)引起的小腸短路電流變化:添加5-HT后,各個(gè)組均出現(xiàn)了短路電流的明顯變化。在空白組,M-Zn處理和S-Zn處理由5-HT引起的△Isc顯著(P<0.05)大于M-Nano
12、Zn處理和S-NanoZn處理,M-Zn處理和S-Zn處理間、M-NanoZn處理和S-NanoZn處理間差異不顯著(P>0.05)。在試驗(yàn)組1,M-Zn處理和S-Zn處理的△Isc顯著(P<0.05)大于M-NanoZn處理,S-NanoZn處理與其他差異不顯著。在試驗(yàn)組2,M-Zn處理和S-Zn處理的△Isc顯著(P<0.05)大于M-NanoZn處理和S-NanoZn處理,M-Zn處理和S-Zn處理間、M-NanoZn處理和S-N
13、anoZn處理間差異不顯著(P<0.05)。
本研究結(jié)果提示:
1.斷奶仔豬日糧中添加300 mg/kg納米氧化鋅能提高日增重,效果與3000mg/kg氧化鋅相當(dāng)。
2.斷奶仔豬日糧中添加300 mg/kg納米氧化鋅對(duì)斷奶后腹瀉有較好的抑制作用;作用效果與3000 mg/kg氧化鋅相當(dāng)。
3.斷奶仔豬日糧中添加300 mg/kg納米氧化鋅能降低斷奶后第7天(D7)和斷奶后第14天(
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