中心體蛋白Cep70調(diào)節(jié)微管組織及微管相關(guān)細(xì)胞活動(dòng)的分子機(jī)制.pdf

1、中心體由一對(duì)互相垂直排列的中心粒及圍繞在中心粒周圍的無定形基質(zhì)組成，是動(dòng)物細(xì)胞主要的微管組織中心。中心體通過核化、組織微管骨架，調(diào)節(jié)許多細(xì)胞活動(dòng)包括細(xì)胞形態(tài)的維持、細(xì)胞極性的建立、有絲分裂和細(xì)胞遷移等。
　　 Cep70是一個(gè)分子量為70 kDa，含597個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，含有兩個(gè)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域。Cep70最初在人類中心體蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中發(fā)現(xiàn)，近幾年Cep70在不同物種中的生物學(xué)功能逐漸被了解。斑馬魚的Cep70調(diào)節(jié)纖毛發(fā)生，

2、從而影響胚胎發(fā)育。而且，Cep70家族的成員--衣藻前中心粒蛋白CRC70在中心粒前體的組裝中發(fā)揮重要作用。但是，哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Cep70的定位和功能目前仍不清楚。在本研究中，我們通過免疫熒光實(shí)驗(yàn)確定Cep70是一個(gè)中心體蛋白。在細(xì)胞周期的各個(gè)時(shí)期，Cep70均定位在中心體上，它通過兩個(gè)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域與γ-微管蛋白相互作用。Cep70調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)原有的和新生微管的組織，而且在體外實(shí)驗(yàn)中，Cep70促進(jìn)微管組裝。在有絲分裂期，Cep70表達(dá)

3、降低使雙極紡錘體的組織和定向異常。
　　 中心體蛋白不僅通過介導(dǎo)紡錘體的形成來調(diào)節(jié)有絲分裂，在其他細(xì)胞活動(dòng)如細(xì)胞遷移中也發(fā)揮重要作用。本研究發(fā)現(xiàn)Cep70通過調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移來影響血管新生。在小鼠體內(nèi)血管新生實(shí)驗(yàn)中，Cep70小干擾RNA顯著抑制血管新生。在體外實(shí)驗(yàn)中，Cep70表達(dá)下調(diào)阻礙了內(nèi)皮細(xì)胞在基質(zhì)膠上的成管能力和在膠原中的出芽生長。在對(duì)Cep70調(diào)節(jié)血管新生的機(jī)制研究中，發(fā)現(xiàn)Cep70通過介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的極化和遷移來調(diào)

4、節(jié)血管新生。而且，Cep70表達(dá)下調(diào)顯著降低了遷移細(xì)胞前端片狀偽足區(qū)域膜皺褶的動(dòng)態(tài)性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Rho GTP酶家族的Cdc42和Rac1的活化在Cep70調(diào)節(jié)血管新生中發(fā)揮作用。這些結(jié)果表明Cep70介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的極化和遷移，從而在血管新生中發(fā)揮作用。
　　 概括來說，本研究首次證實(shí)Cep70是一個(gè)中心體蛋白，通過結(jié)合γ-微管蛋白定位在中心體上。而且，Cep70能調(diào)節(jié)微管的組織和有絲分裂紡錘體的定向。另外，本研究發(fā)現(xiàn)Ce