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1、目的:應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)先天性巨結(jié)腸癥(Hirschsprung's disease,HD)患兒擴(kuò)張段和痙攣段腸壁神經(jīng)叢中微管相關(guān)蛋白-2(Microtubule AssociatedProtein-2,MAP-2)的表達(dá),同時(shí)設(shè)立對(duì)照組。進(jìn)一步探討先天性巨結(jié)腸癥的發(fā)病機(jī)制與腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系,以期找到診斷先天性巨結(jié)腸癥的有效方法。
方法:⑴標(biāo)本取自廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院小兒外科2008~2010年確診HD患兒并手術(shù)切除的
2、腸組織30例,作為實(shí)驗(yàn)組。并選取15例年齡與之相近的無(wú)HD患兒手術(shù)切除的結(jié)腸標(biāo)本作為對(duì)照組。⑵對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)腸標(biāo)本的痙攣段、擴(kuò)張段和對(duì)照組腸壁組織進(jìn)行切片行HE染色和MAP-2的免疫組織化學(xué)染色,并定性、定位及定量分析,分別判定各指標(biāo)在HD擴(kuò)張段與痙攣段神經(jīng)叢中陽(yáng)性染色面積百分比,所得數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:①實(shí)驗(yàn)組HD擴(kuò)張段和對(duì)照組腸壁肌間神經(jīng)叢及粘膜神經(jīng)叢中都存在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,大小不等;HD的痙
3、攣段未見(jiàn)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,并且各層中神經(jīng)纖維排列紊亂。②MAP-2免疫組化染色可見(jiàn)在HD擴(kuò)張段及對(duì)照組結(jié)腸的肌間及粘膜下神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞漿內(nèi)呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),神經(jīng)纖維呈弱陽(yáng)性或陰性表達(dá);而HD痙攣段腸壁肌間神經(jīng)叢及粘膜下神經(jīng)叢中MAP-2則末見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,神經(jīng)纖維大多呈陰性表達(dá),少數(shù)呈弱陽(yáng)性表達(dá)。③定量分析:MAP-2在HD擴(kuò)張段及痙攣段神經(jīng)叢中平均陽(yáng)性染色面積的百分率均數(shù)分別為0.26和0.12;經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件分析,各指標(biāo)在HD擴(kuò)張段
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