脂聯(lián)素預(yù)處理對大鼠肝臟缺血再灌注膽管損傷的保護作用研究.pdf

1、研究目的:脂聯(lián)素是主要由脂肪細胞分泌的特異性蛋白，具有抗糖尿病特性。最近有研究發(fā)現(xiàn)其參與炎癥反應(yīng)，并且在心臟、腎臟缺血再灌注損傷中得到印證。但是對于脂聯(lián)素在肝缺血再灌注膽道損傷作用相關(guān)報道很少。本研究觀察脂聯(lián)素在肝臟熱缺血再灌注膽管損傷的保護作用及其對膽管細胞凋亡影響，探討其中可能存在的保護機制。
　　研究方法:(1)肝臟缺血再灌注模型的建立及脂聯(lián)素的表達。建立70％缺血再灌注模型，將36只SD大鼠隨機分為3組:空白組、缺血再灌注

2、組、脂聯(lián)素處理組，每組12只。術(shù)后3、6、12、24h采取血清測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)和總膽紅素(TBIL)濃度，并對膽道組織進行組織病理學(xué)檢查并進行組織病理學(xué)評分(BDISS)。(2)脂聯(lián)素對缺血再灌注誘導(dǎo)的膽道損傷細胞因子的調(diào)節(jié)作用。采用ELISA法分別測定血液中IL-6濃度及TNF-α濃度;PCR法測膽管組織IL-10及TNF-α mRNA。(3)脂聯(lián)素對缺血再灌注誘導(dǎo)的膽道損傷細胞凋亡的影響。TUNEL

3、法測定各組膽管細胞凋亡情況;Western blot法檢測各組Caspase-3蛋白含量;免疫組化檢測Fas蛋白表達情況。1
　　研究結(jié)果:(1)缺血再灌注加重膽道損傷，膽管組織病理學(xué)評分和血清ALT、ALP、TBIL顯示各組間有顯著性差異(P＜0.05)。脂聯(lián)素處理組明顯改善膽道損傷，空白組、缺血再灌注組、脂聯(lián)素處理組病理組織學(xué)評分分別為0、8.34±1.16、4.67±1.52，各組比較均有差異(P＜0.05)。(2)缺血再灌

4、注組血清IL-6和TNF-α水平明顯高于空白組，并且與脂聯(lián)素組相比有明顯差異(P＜0.05)。脂聯(lián)素組炎癥因子IL-6及TNF-α均低于缺血再灌注組。脂聯(lián)素組膽道組織TNF-α mRNA下降，IL-10 mRNA增高，差異有顯著性(P＜0.05)。(3) TUNEL實驗發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素組膽管細胞凋亡明顯減少?？瞻捉M，缺血再灌注組和脂聯(lián)素處理組Caspase-3相對蛋白表達水平分別為8.11±1.44，73.26±7.21，42.48±3.37