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1、我們用復(fù)合纖維素酶降解殼聚糖制備的殼寡糖平均分子量約為1000 Da,N-乙?;刃∮?5%,HPLC結(jié)果顯示其主要組分為殼六糖.該課題以小鼠單核/巨噬類(lèi)細(xì)胞RAW264.7為研究對(duì)象,觀察殼寡糖單獨(dú)作用于巨噬細(xì)胞對(duì)其產(chǎn)生NO的影響,并初步探討了核轉(zhuǎn)錄因子-kappa B(NF-κB)在這過(guò)程中的作用,旨在部分解釋殼寡糖對(duì)免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用的機(jī)理,為其在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用提供理論依據(jù).試驗(yàn)中采用Western blot法檢測(cè)細(xì)胞核內(nèi)NF-κB的
2、變化,用Griess還原法觀察殼寡糖對(duì)巨噬細(xì)胞釋放NO的作用以及NF-κB抑制劑對(duì)殼寡糖誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞釋放NO作用的影響.用誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)檢測(cè)試劑盒測(cè)定胞質(zhì)內(nèi)iNOS的活性.該試驗(yàn)表明:殼寡糖單獨(dú)作用于單核/巨噬細(xì)胞可明顯誘導(dǎo)iNOs基因表達(dá),使NO生成增加,NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)途徑參與殼寡糖對(duì)巨噬細(xì)胞的激活過(guò)程,這是殼寡糖在體外引起巨噬細(xì)胞免疫活性增強(qiáng)的重要細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制.由于NF-κB抑制劑沒(méi)有完全阻斷殼寡糖對(duì)巨噬細(xì)
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