巨噬細(xì)胞釋放超氧陰離子和一氧化氮的調(diào)控機(jī)理.pdf

1、本文以fMLP短肽刺激巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)產(chǎn)生超氧陰離子，以脂多糖/γ-干擾素誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮為模型，研究了巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)的動(dòng)力學(xué)過程及其機(jī)制，以及褪黑素、阿魏酸和川芎嗪對(duì)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生、釋放超氧陰離子和一氧化氮自由基的調(diào)控機(jī)理。利用化學(xué)發(fā)光法監(jiān)測(cè)了巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)的動(dòng)態(tài)過程，結(jié)果表明巨噬細(xì)胞的呼吸爆發(fā)過程中超氧陰離子的化學(xué)發(fā)光峰與一氧化氮的產(chǎn)生有關(guān)。超微弱化學(xué)發(fā)光和電子順磁共振研究表明，褪黑素能有效的清除由fMLP刺激巨噬細(xì)胞呼

2、吸爆發(fā)產(chǎn)生的超氧陰離子自由基，同時(shí)也能抑制超氧陰離子自由基的產(chǎn)生。阿魏酸與褪黑素的效果相似，也能有效的清除由fMLP刺激巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)的超氧陰離子自由基和抑制超氧陰離子自由基的產(chǎn)生，而川芎嗪在高濃度時(shí)雖對(duì)超氧陰離子自由基的抑制或清除有一定的效果，但相比于阿魏酸而言卻并不顯著。采用反轉(zhuǎn)錄基因擴(kuò)增技術(shù)（RT-PCR）和蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)分析了巨噬細(xì)胞一氧化氮合酶（iNOS）的基因的轉(zhuǎn)錄，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明褪黑素能抑制iNOS基因的轉(zhuǎn)錄，從而抑制

3、iNOS蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致一氧化氮自由基的產(chǎn)生的減少。其可能原因是褪黑素能夠調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB來影響iNOS蛋白表達(dá)；同樣，川芎嗪能抑制巨噬細(xì)胞iNOS的基因的轉(zhuǎn)錄，從而抑制iNOS蛋白的表達(dá)，具有有效清除一氧化氮或抑制一氧化氮自由基的產(chǎn)生的能力，達(dá)到調(diào)控釋放一氧化氮的目的，但是阿魏酸的這一作用卻并不顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示褪黑素、阿魏酸和川芎嗪對(duì)機(jī)體的抗氧化和保護(hù)作用，是由于它們能清除超氧陰離子自由基，或調(diào)控抑制一氧化氮自由基的大量產(chǎn)