腧穴敏化和電針鎮(zhèn)痛的量效關(guān)系.pdf

1、當(dāng)內(nèi)臟發(fā)生疾病時(shí),體表相應(yīng)部位出現(xiàn)皮下結(jié)節(jié)、牽涉痛、皮疹等病理反應(yīng)的臨床報(bào)道很多,這些病理反應(yīng)常常伴隨著疾病的發(fā)生而出現(xiàn),并隨著疾病的自愈而消退。這種內(nèi)臟疾病能反應(yīng)到體表的現(xiàn)象,中醫(yī)遠(yuǎn)在兩千年前早已發(fā)現(xiàn),《素問(wèn)·藏氣法時(shí)論》記載:“心痛者,胸中痛,脅支滿、膺背肩甲間痛,兩臂內(nèi)痛?！睆拇嗣枋稣f(shuō)明中國(guó)古代醫(yī)生早已發(fā)現(xiàn)心痛可以反應(yīng)到肩甲、兩臂內(nèi)側(cè)等處,這不僅與臨床上冠心病牽涉痛常出現(xiàn)的部位相一致,也正是十二經(jīng)脈中心經(jīng)經(jīng)脈循行所過(guò)之處.因此,也

2、有學(xué)者認(rèn)為中醫(yī)的經(jīng)脈一臟腑相關(guān)理論是世界上最早的軀體一內(nèi)臟相關(guān)學(xué)說(shuō)。
　　 基于中醫(yī)經(jīng)脈一臟腑相關(guān)理論和西醫(yī)的軀體一內(nèi)臟相關(guān)學(xué)說(shuō),近年有學(xué)者提出腧穴面積的大小和功能的強(qiáng)弱會(huì)隨著內(nèi)臟功能的變化而發(fā)生改變的動(dòng)態(tài)概念,并將這一規(guī)律稱為腧穴的敏化。敏化腧穴不僅是一種新型的內(nèi)臟疾病在體表的病理反應(yīng)點(diǎn),還是針灸治療內(nèi)臟疾病的最佳刺激點(diǎn),當(dāng)內(nèi)臟發(fā)生疾病時(shí),體表沉寂的腧穴可以被激活,其功能變得敏感而活躍,對(duì)相應(yīng)內(nèi)臟調(diào)節(jié)功能的“質(zhì)”或“量”也會(huì)發(fā)

3、生相應(yīng)的變化。
　　 針灸可以治療內(nèi)臟疾病,緩解內(nèi)臟疼痛,其療效與電針強(qiáng)度、取穴部位密切相關(guān)。有關(guān)針刺鎮(zhèn)痛的研究發(fā)現(xiàn)在同神經(jīng)節(jié)段腧穴,針刺只要激活穴位深部的A類纖維就有明顯的鎮(zhèn)痛效應(yīng),而在異神經(jīng)節(jié)段腧穴,針刺須激活穴位深部的C類纖維才能發(fā)揮鎮(zhèn)痛效應(yīng)。其機(jī)制可能與激活了脊髓和脊髓上中樞不同的內(nèi)源性鎮(zhèn)痛系統(tǒng)有關(guān)。
　　 雖然針刺鎮(zhèn)痛的臨床和實(shí)驗(yàn)研究很多,但是同時(shí)將痛源部位、體表敏化腧穴、電針強(qiáng)度綜合起來(lái)考慮的研究甚少,關(guān)于體

4、表敏化腧穴不同強(qiáng)度電針刺激緩解內(nèi)臟痛的量效關(guān)系研究還是空白。
　　 本研究將具有軀體一內(nèi)臟感覺(jué)會(huì)聚功能的脊髓背角廣動(dòng)力型(Wide Dynamic Rango,WDR)神經(jīng)元和延髓背側(cè)網(wǎng)狀核(SubnucleusReticularis Dorsalis,SRD)全身異覺(jué)異位會(huì)聚神經(jīng)元活動(dòng)作為研究對(duì)象,觀察生理和病理狀態(tài)下這兩類會(huì)聚神經(jīng)元對(duì)不同強(qiáng)度電針傳入的量-效激活反應(yīng),以及不同強(qiáng)度電針傳入與內(nèi)臟傷害性傳入在這兩類神經(jīng)元的相互作

5、用,來(lái)探討腧穴敏化的規(guī)律和機(jī)制、電針鎮(zhèn)痛的量效關(guān)系,以期闡明電針治療內(nèi)臟痛的最佳刺激部位和刺激強(qiáng)度,為臨床提高電針鎮(zhèn)痛效應(yīng)提供參考。
　　 1、材料和方法：實(shí)驗(yàn)選用健康成年SD大鼠,體重250-300g,用10％的烏拉坦(urethane,1.0-1.2g/kg)腹腔注射麻醉,玻璃微電極細(xì)胞外記錄神經(jīng)元放電。
　　 所有記錄到的神經(jīng)元都用刷毛法觀察其外周感受野在體表的分布范圍,分別檢驗(yàn)其體表感受野對(duì)各種機(jī)械刺激(包括觸摸

6、、電針、齒鑷夾皮)的反應(yīng)和直結(jié)腸擴(kuò)張刺激引起的反應(yīng),鑒定神經(jīng)元的性質(zhì)。在脊髓背角,凡是能夠?qū)?lái)自體表感受野的各種機(jī)械刺激和來(lái)自內(nèi)臟的擴(kuò)張刺激均起激活反應(yīng)的神經(jīng)元,就被確定為WDR神經(jīng)元;在延髓,凡是具有全身性的感受野,并且只能特異性地被體表和內(nèi)臟的傷害性刺激激活,而對(duì)非傷害性刺激不發(fā)生反應(yīng)的神經(jīng)元就被確定為SRD神經(jīng)元。
　　 內(nèi)臟傷害性刺激采用直結(jié)腸擴(kuò)張法,將一長(zhǎng)約5-6cm的氣囊經(jīng)肛門插入直結(jié)腸,插入的深度約為4cm。內(nèi)臟傷

7、害性刺激由插入直結(jié)腸內(nèi)的氣囊充氣超過(guò)20-50s實(shí)現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直結(jié)腸擴(kuò)張壓力控制在60-80mmHg之間(≥40mmHg為傷害性刺激),兩次重復(fù)的CRD刺激應(yīng)至少間隔4min。
　　 分別在大鼠L2-4節(jié)段脊髓背角和延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核進(jìn)行單細(xì)胞記錄。觀察內(nèi)容分兩部分:(1)觀察WDR和SRD神經(jīng)元在傷害性CRD刺激穩(wěn)定激活的基礎(chǔ)上,同時(shí)給予不同強(qiáng)度電針刺激對(duì)CRD引起的神經(jīng)元痛敏反應(yīng)的影響,探討電針鎮(zhèn)痛的量效關(guān)系;(2)觀察在持

8、續(xù)lmin的傷害性CRD刺激前后,這兩類神經(jīng)元對(duì)來(lái)自感受野單純電針刺激的量一效激活反應(yīng)的變化,探討腧穴敏化的規(guī)律及其機(jī)制。
　　 2、結(jié)果
　　 2.1、脊髓水平的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　 于93只SD大鼠脊髓背角的L2-4節(jié)段共記錄到168個(gè)神經(jīng)元。其中廣動(dòng)力型(wide dynamic range neuron,WDR)神經(jīng)元118個(gè)。大部分WDR神經(jīng)元位于脊髓板層的第Ⅳ和Ⅴ層,其外周感受野主要分布于記錄部位同側(cè)下半部

9、皮膚,如:尾巴、下肢、會(huì)陰和臀部。
　　 在12個(gè)WDR神經(jīng)元觀察到60mmHg CRD刺激引起的神經(jīng)元放電活動(dòng)的激活率為100.90±21.41%,和背景活動(dòng)相比有非常顯著的差異(P＜0.001),表明WDR神經(jīng)元對(duì)來(lái)自同節(jié)段的內(nèi)臟傷害性傳入有穩(wěn)定的激活反應(yīng)。
　　 在60mmHg CRD刺激引起WDR神經(jīng)元穩(wěn)定激活的基礎(chǔ)上,我們?cè)隗w表非感受野分別觀察了同神經(jīng)節(jié)段穴區(qū)(選擇位于記錄部位對(duì)側(cè)“足三里”穴區(qū)為中心)和異神經(jīng)

10、節(jié)段穴區(qū)(選擇位于記錄部位對(duì)側(cè)“內(nèi)關(guān)”穴區(qū)為中心)不同強(qiáng)度(1mA、2mh、4mA、6mA、8mA)電針刺激對(duì)CRD引起的神經(jīng)元激活反應(yīng)的影響。
　　 在同神經(jīng)節(jié)段,電針能有效抑制CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng),和單純CRD刺激引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)相比,其抑制率分別為:11.43±3.40S(1mA)(P0.05)、25.56±2.69%(2mA)(P＜0.001)、46.35±3.44%(4mA)(P＜0.001)

11、、49.96±3.08%(6mA)(P＜0.001)、47.04±4.79%(8mA)(P＜0.001).
　　 而在異神經(jīng)節(jié)段,1mA電針刺激對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)沒(méi)有產(chǎn)生明顯影響,與單純CRD刺激時(shí)神經(jīng)元的反應(yīng)相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);當(dāng)電針強(qiáng)度達(dá)到2mA時(shí),我們開(kāi)始觀察到電針對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)的抑制效應(yīng)。從2-8mA,其抑制率分別為:19.70±6.61%(2mA)(P＜0.05)

12、、33.71±3.93%(4mA)(P＜0.001)、40.25±4.71%(6mA)(P＜0.001)、40.44±5.68%(8mA)(P＜0.001)。
　　 表明當(dāng)電針強(qiáng)度為1mA時(shí),只能引起節(jié)段性的抑制效應(yīng);而當(dāng)電針強(qiáng)度達(dá)到2mA時(shí),能引起廣泛性的抑制效應(yīng);當(dāng)電針強(qiáng)度達(dá)到4-6mA時(shí),這種抑制效應(yīng)還會(huì)到達(dá)一個(gè)平臺(tái)期。
　　 之后,我們觀察了體表感受野穴區(qū)(選擇位于記錄部位同側(cè)的“足三里”穴區(qū)為中心)不同強(qiáng)度電針

13、傳入與內(nèi)臟傷害性傳入在WDR神經(jīng)元的相互作用。
　　 首先觀察單純電針刺激對(duì)WDR神經(jīng)元的量-效激活反應(yīng),和神經(jīng)元背景活動(dòng)相比,單純電針刺激引起的WDR神經(jīng)元的激活率分別為:14.50±4.63%(1mA)(P＜0.05)、40.09±6.27%(2mA)(P＜0.001)、99.47±13.18%(4mA)(P＜0.001)、156.62±20.50%(6mA)(P＜0.001)、189.15±11.33%(8mA)(P＜0.

14、001)?？梢?jiàn),從1mA-8mA的范圍內(nèi),WDR神經(jīng)元對(duì)單純電針刺激的激活反應(yīng)呈明顯的量-效線性遞增關(guān)系。
　　 然后在CRD弓l起WDR神經(jīng)元穩(wěn)定激活的基礎(chǔ)上,同時(shí)給予電針刺激,當(dāng)電針刺激強(qiáng)度為1mA時(shí),電針對(duì)CRD引起的WDR神經(jīng)元激活反應(yīng)無(wú)明顯影響(P＞0.05)。當(dāng)電針強(qiáng)度為2mA時(shí),電針可以使WDR神經(jīng)元的激活反應(yīng)進(jìn)一步增強(qiáng),神經(jīng)元的反應(yīng)從單純CRD激活的基礎(chǔ)上依次再激活43.46±5.97%(2mA)(P＜0.001

15、)、77.44±8.32%(4mA)(P＜0.001)、85.29±7.08%(6mA)(P＜0.001)、90.38±13.01%(8mA)(P＜0.01)?？梢?jiàn),同時(shí)給予CRD和感受野電針兩種刺激,WDR神經(jīng)元在電針強(qiáng)度達(dá)到6mA時(shí),其激活反應(yīng)也接近平臺(tái)期。
　　 這些結(jié)果還表明來(lái)自感受野穴位的電針傳入和來(lái)自內(nèi)臟的傷害性傳入可以在脊髓背角WDR神經(jīng)元產(chǎn)生易化的相互作用。
　　 基于以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為了探討腧穴敏化的脊髓

16、機(jī)制,我們給予大鼠70-80mmHg CRD刺激持續(xù)1min造成內(nèi)臟傷害性損傷后,觀察WDR神經(jīng)元對(duì)感受野穴位單純電針刺激的激活反應(yīng)的變化。實(shí)驗(yàn)觀察到在CRD刺激后WDR神經(jīng)元對(duì)電針的激活反應(yīng)明顯增強(qiáng)。CRD刺激前,電針引起的WDR神經(jīng)元放電活動(dòng)的激活率分別為:18.19±7.49％(1mA)、105.39±17.21%(4mA)、175.81±20.16%(7mA)、200.14±23.49%(10mA);而CRD刺激后,電針弓I起的

17、WDR神經(jīng)元放電活動(dòng)的激活率分別為:95.09±26.37%(1mA)、202.44±18.90%(4mA)、278.41±32.64%(7mA)、280.84±39.87%(10mA)。并且在CRD刺激后,當(dāng)電針強(qiáng)度達(dá)到7mA時(shí),WDR神經(jīng)元對(duì)電針的反應(yīng)也接近平臺(tái)期。表明持續(xù)的傷害性內(nèi)臟傳入可以易化脊髓背角WDR神經(jīng)元,使其對(duì)來(lái)自體表感受野穴位的電針傳入產(chǎn)生更強(qiáng)烈的反應(yīng)。
　　 2.2、延髓水平的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　 于49

18、只SD大鼠的延髓背角共記錄到68個(gè)延髓背側(cè)網(wǎng)狀亞核(Subnucleus Reticularis Dotsalis,SRD)神經(jīng)元。
　　 在16個(gè)SRD神經(jīng)元系統(tǒng)觀察了分級(jí)的CRD刺激引起的反應(yīng),在20-80mmHg的范圍內(nèi),隨著內(nèi)臟擴(kuò)張壓力的升高,神經(jīng)元反應(yīng)的強(qiáng)度也隨之增加,呈現(xiàn)出明顯的量一效線性關(guān)系。表明SRD神經(jīng)元對(duì)傷害性強(qiáng)度的內(nèi)臟擴(kuò)張刺激能做出準(zhǔn)確的應(yīng)答反應(yīng)。
　　 由于這類神經(jīng)元具有全身性的感受野,在60mm

19、Hg CRD刺激引起SRD神經(jīng)元穩(wěn)定激活的基礎(chǔ)上,我們觀察了與直結(jié)腸同神經(jīng)節(jié)段的“足三里”穴區(qū)(取對(duì)側(cè))不同強(qiáng)度(1mA、2mA、4mA、6mA、8mA)電針刺激對(duì)CRD引起的SRD神經(jīng)元激活反應(yīng)的影響.
　　 實(shí)驗(yàn)觀察到1mA電針刺激對(duì)CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)沒(méi)有明顯影響,電針后神經(jīng)元的反應(yīng)和單純CRD刺激效應(yīng)相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);2mA電針刺激對(duì)CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應(yīng)有一定的抑制作用,其抑

20、制率為19.43±3.28%(P＜0.01)、4mA、6mA、8mA電針刺激引起的抑制率分別為31.87±3.92%(P＜0.001)、51.78±5.13%(P＜0.001)、55.70±7.82%(P＜0.01)?？梢?jiàn),隨著電針強(qiáng)度的增加,電針的抑制效應(yīng)逐漸增強(qiáng),但是當(dāng)電針強(qiáng)度達(dá)到6mA時(shí),這種抑制效應(yīng)也接近平臺(tái)期。
　　 為了探討腧穴敏化的延髓機(jī)制,這部分實(shí)驗(yàn)同樣給予大鼠70-80mmHg CRD刺激持續(xù)1min造成內(nèi)臟傷

21、害性損傷后,觀察電針“足三里”穴區(qū)對(duì)SRD神經(jīng)元激活閾值和強(qiáng)度的變化,實(shí)驗(yàn)選擇1.5mA和6mA分別代表低于和高于C類纖維閾值的的電針強(qiáng)度.
　　 結(jié)果顯示在CRD刺激前,1.5mA電針刺激對(duì)SRD神經(jīng)元的放電活動(dòng)沒(méi)有任何影響,與背景活動(dòng)相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);而在CRD刺激后,1.5mA電針刺激能明顯激活SRD神經(jīng)元,神經(jīng)元的活動(dòng)從背景活動(dòng)的3.05±0.20spikes/s增加到4.81±0.46 spikes/

22、s,與背景活動(dòng)相比,有非常顯著的差異(P＜0.001)。
　　 當(dāng)電針強(qiáng)度達(dá)到6mA時(shí),CRD刺激前后電針對(duì)SRD神經(jīng)元均有明顯的激活作用。CRD刺激前后,電針引起的SRD神經(jīng)元的激活率分別為318.34±53.56%、381.04±59.68%,CRD刺激前后的電針效應(yīng)進(jìn)行比較有顯著的差異(P＜0.01)。表明給予大鼠傷害性內(nèi)臟擴(kuò)張損傷后也可以易化延髓SRD神經(jīng)元。
　　 3、結(jié)論：
　　 本研究系統(tǒng)分析了體表

23、不同強(qiáng)度電針傳入和內(nèi)臟傷害性傳入在脊髓背角WDR神經(jīng)元和延髓背角SRD神經(jīng)元的相互作用,得出以下結(jié)論:電針可以在脊髓和延髓抑制內(nèi)臟傷害性反應(yīng),但是只有當(dāng)電針達(dá)到一定的刺激強(qiáng)度時(shí),電針的抑制效應(yīng)才最明顯,但并不是電針刺激強(qiáng)度越大,電針的抑制效應(yīng)越明顯。根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在脊髓水平,同節(jié)段穴區(qū)電針刺激強(qiáng)度在4-6mA時(shí)、異節(jié)段穴區(qū)電針刺激強(qiáng)度在6mA時(shí),就能取得良好的抑制效應(yīng);而在延髓水平,電針強(qiáng)度在6mA時(shí)也能取得良好的抑制效應(yīng)。從抑制