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1、垂體中葉素Intermedin(IMD)是2004年發(fā)現(xiàn)的降鈣素相關(guān)肽(CGRP)超家族成員,是重要的內(nèi)源性心血管、腎臟保護(hù)因子,在腎臟有很高的分泌,可增加腎血流、尿量,降低腎血管阻力,但其對(duì)腎臟的保護(hù)機(jī)制尚不清楚。本研究采用基因轉(zhuǎn)染的方法使腎組織局部高表達(dá)IMD,觀察IMD 預(yù)處理對(duì)腎臟IRI修復(fù)再生過(guò)程中相關(guān)修復(fù)基因的表達(dá)的影響,探討IMD對(duì)腎臟IRI修復(fù)過(guò)程的影響及機(jī)制。
目的:探討Intermedin(IMD)預(yù)處
2、理對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷(IRI)修復(fù)再生過(guò)程中Vimentin等相關(guān)修復(fù)基因的影響。
方法:健康雄性Wistar大鼠144只,隨機(jī)分為假手術(shù)組、IRI組、轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組和轉(zhuǎn)染IMD組。動(dòng)物右腎切除后,用超聲微泡技術(shù)將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入左腎,一周后制作腎臟IRI模型。分別于再灌注1d、2d、3d、4d、7d和14d 留取腎組織標(biāo)本。RT-PCR 法檢測(cè)腎組織Pax-2、ZO-1、Ncam、Wt-1和Vimentin的Mrna表達(dá)變
3、化;Western blotting 法分析Pax-2、Wt-1和Vimentin蛋白表達(dá)變化;ELISIA 法檢測(cè)ZO-1、Ncam的蛋白表達(dá)變化。
結(jié)果:(1)IRI組大鼠Pax-2、Zo-1、Ncam、Wt-1和Vimentin在IRI后1d 到3d明顯表達(dá)增加,與假手術(shù)組相比具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。4d后基本恢復(fù)(P>0.05)。(2)轉(zhuǎn)染IMD組,在IRI后1d 到4d的Pax-2、Zo-1、Nca
4、m、Wt-1和Vimentin表達(dá)均顯著高于同時(shí)間點(diǎn)其它3組,與其它3組分別比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。(3)IRI組、轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組和轉(zhuǎn)染IMD組三組上述基因的7d、14d表達(dá)和正常組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);IRI組和轉(zhuǎn)空質(zhì)粒組4d的表達(dá)較正常組增高,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(4)IRI組和轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組之間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(5)運(yùn)用RT-PCR 檢測(cè)上述指標(biāo)的Mrna表達(dá)變化與運(yùn)用we
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