缺血后處理對(duì)大鼠腎臟缺血再灌注損傷及NF-κB表達(dá)的影響.pdf

1、目的：腎臟急性缺血再灌注損傷是發(fā)生急性腎功能衰竭的重要危險(xiǎn)因素，也是各科危重疾病之一，如何有效的減輕腎臟缺血再灌注損傷已是目前研究的熱點(diǎn)，許多學(xué)者對(duì)此進(jìn)行研究。大部分學(xué)者利用藥物等外源性保護(hù)措施來減輕器官的缺血再灌注損傷，但有一定的局限性及藥物副作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)于缺血前給予反復(fù)短暫的缺血再灌注處理，即缺血預(yù)處理，可以有效的減輕缺血再灌注損傷，但臨床上缺血難以預(yù)先判斷，缺血預(yù)處理不能很好的先于缺血實(shí)施，在實(shí)踐應(yīng)用上存在著局限性。近年來，有

2、學(xué)者發(fā)現(xiàn)缺血后處理在心臟的缺血再灌注損傷中有保護(hù)作用，但對(duì)其在腎臟中的研究還少有報(bào)道，由于缺血后處理可控性強(qiáng)，有著臨床應(yīng)用前景，因此，研究缺血后處理對(duì)腎臟的保護(hù)作用具有意義。本實(shí)驗(yàn)在建立大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型的基礎(chǔ)上探討缺血后處理對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷及腎組織中NF-κB表達(dá)的影響。 方法：實(shí)驗(yàn)用雄性SD大鼠18只，采用夾閉左側(cè)腎動(dòng)脈60min后再灌注6h制備腎臟缺血再灌注損傷模型，隨機(jī)分為3組：缺血再灌注組（IR組，n=6

3、）：在分離左側(cè)腎動(dòng)脈并夾閉左側(cè)腎動(dòng)脈60min后，完全恢復(fù)腎臟血流。缺血后處理組（IPO組，n=6）：在分離左側(cè)腎動(dòng)脈并夾閉左側(cè)腎動(dòng)脈60min后，于再灌注即刻執(zhí)行重復(fù)6次再灌注10s，缺血10s的處理，再完全恢復(fù)腎臟血流。假手術(shù)組（Sham組，n=6）：游離左側(cè)腎動(dòng)脈不夾閉。3組都于再灌注6h后處死大鼠抽取腹主動(dòng)脈血并活體切取左腎。測(cè)定血尿素氮（Bun）、血肌酐（Cr）濃度，檢測(cè)腎臟組織中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）

4、含量和髓過氧化物酶（MPO）活性；取左腎組織經(jīng)石蠟包埋行HE染色，光鏡下觀察腎臟組織病理學(xué)改變，免疫組化法檢測(cè)腎臟組織中NF-κB表達(dá)。 結(jié)果： 1．與IR組比較，IPO組血Cr和血Bun濃度降低（P<0．01），分別為58．98±8．02μmol/L、9．45±1．03mmol/L（P<0．01），SOD活性升高（P<0．01），為230．90±9．19U/mgprot（P<0．01），MDA含量降低（P<0．01），

5、為3．67±0．20nmol/mgprot，MPO活力降低（P<0．01），為0．78±0．06U/g。 2．與Sham組比較，IR組血Cr濃度和血Bun濃度上升（P<0．01），達(dá)到93．02±13．44μmol/L和15．58±0．56mmol/L，SOD活性下降（P<0．01），為185．87±17．68U/mgprot，MDA含量和MPO活性增加（P<0．01），分別達(dá)到4．09±0．34nmol/mgprot、0．90

6、±0．07U/g。IPO組血Cr、Bun濃度、MPO活性與Sham組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），SOD活性與MDA含量與Sham組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3．缺血后處理后腎臟組織病理學(xué)變化：經(jīng)過缺血60min再灌注6h后，Sham組腎臟組織結(jié)構(gòu)基本正常，腎小管上皮細(xì)胞基本完整。IR組腎臟組織結(jié)構(gòu)異常，表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞受損，腎組織明顯水腫，腎小管略擴(kuò)張。IPO組腎小管上皮細(xì)胞相對(duì)完整，腎臟組織水腫減輕。 4．

7、缺血后處理對(duì)腎臟組織中NF-κB表達(dá)的影響：經(jīng)過缺血60min再灌注6h后，Sham組可見NF-κB于細(xì)胞胞漿中有極微的表達(dá)，IR組腎小管上皮細(xì)胞中NF-κB表達(dá)增強(qiáng)，IPO組腎小管上皮細(xì)胞中NF-κB表達(dá)減弱。應(yīng)用Image Pro Plus6．0圖像分析系統(tǒng)分析，IPO組與IR組比較差異有顯著性（P<0．01）。 結(jié)論：缺血后處理作為一種新近發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性保護(hù)措施可以減輕腎臟缺血再灌注損傷，減輕腎臟組織水腫，保護(hù)腎臟功能，其對(duì)