血脂康對(duì)2型糖尿病大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度影響的研究.pdf

1、目的：采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn),觀察血脂康干預(yù)治療對(duì)高糖高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠血清及頸動(dòng)脈腫瘤壞死因子-α(TNF—α)表達(dá)的改變,同時(shí)檢測干預(yù)前后頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度(IMT),探討血脂康改善2型糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化的作用。
　　 方法：54只4—5周齡(150g-180g)清潔級(jí)雄性Wistar大鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后(5只／籠),隨機(jī)分為對(duì)照組(空白對(duì)照組,A組,n=18)和2型糖尿病組(T2DM組,n=36),其中對(duì)照組給予常規(guī)飼料(

2、13.4kJ／g,其中脂肪提供熱量占10.2％,蛋白質(zhì)占23.3％,碳水化合物占66.5％)；2型糖尿病組給予高糖高脂飼料(21.8kJ／g,其中脂肪提供熱量占56.0％,蛋白質(zhì)占7.0％,碳水化合物占37.0％)。均自由飲水,室溫控制在18～22℃,相對(duì)濕度30％～70％。兩組大鼠每日早晚投食兩次,每日每只大鼠的投食量為其體重的3％。12周時(shí),做葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT):禁食8h后,鼠尾采血用快速血糖儀測空腹血糖(FBG),以50％

3、葡萄糖注射液2g／kg體重灌胃,2h后再次鼠尾采血測餐后2h血糖(2hPG)。以餐后2小時(shí)血糖(2hPG)≥16.7mmol／L并持續(xù)一周以上為造模成功。對(duì)照組血糖正常,繼續(xù)給予常規(guī)飼料喂養(yǎng),自由飲水;2 型糖尿病組成模大鼠隨機(jī)分為糖尿病對(duì)照組(T2DM對(duì)照組,B組,n=18),血脂康干預(yù)組(T2DM干預(yù)組,C組,n=18),兩組均繼續(xù)給予高糖高脂喂養(yǎng),自由飲水。T2DM對(duì)照組和T2DM干預(yù)組繼續(xù)飼養(yǎng)12周后開始血脂康干預(yù)。血脂康干預(yù)組

4、給予血脂康膠囊0.15g／kg／d(人用量的7.5倍)混懸液灌胃[6],空白對(duì)照組和T2DM對(duì)照組給予等體積生理鹽水灌胃。
　　 于實(shí)驗(yàn)的第4周、8周、12周各取6只Wistar大鼠稱重,實(shí)驗(yàn)結(jié)束的前1天禁食12～14h后,鼠尾采血用快速血糖儀測空腹血糖,隨后用5％水合氯醛0.6ml／100g體重腹腔注射麻醉大鼠,腹主靜脈取血,血標(biāo)本迅速離心留取血清-70℃保存,待測各相關(guān)指標(biāo)。切取頸動(dòng)脈組織一部分凍存于-70℃冰箱,用于RT-

5、PCR法測定TNF-α的表達(dá),另一部分固定、包埋、制備病理切片用于光鏡下觀察頸動(dòng)脈組織形態(tài)學(xué)改變及測定頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度IMT。
　　 所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,計(jì)量資料結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示；采用完全隨機(jī)分組析因設(shè)計(jì)的方差分析；相關(guān)性研究采用Pearson直線相關(guān)分析,取P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.B組和C組大鼠血清TNF-α水平較A組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

6、義(P<0.05)；C組較B組血清TNF-α水平降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 2.RT-PCR結(jié)果顯示,B組和C組大鼠頸動(dòng)脈組織中TNF-α的mRNA表達(dá)較A組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；C組與B組比較頸動(dòng)脈組織中TNF—α的mRNA表達(dá)減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 3.頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度IMT:B組和C組大鼠較A組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；C組較B組降

7、低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 4.光鏡下觀察組織形態(tài)學(xué)變化:B組大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞排列逐漸紊亂,中膜平滑肌細(xì)胞明顯增生,導(dǎo)致頸動(dòng)脈管壁顯著增厚,管腔狹窄。經(jīng)血脂康干預(yù)后,上述病理改變顯著減輕,且隨時(shí)間延長病變改善更顯著。
　　 5.直線相關(guān)分析結(jié)果顯示:2型糖尿病大鼠頸動(dòng)脈TNF—α的mRNA表達(dá)與IMT存在明顯正相關(guān)關(guān)系,隨著TNF—α mRNA在頸動(dòng)脈中表達(dá)量的增加,IMT逐漸增大。
　　 結(jié)