富含短肽的海洋蛋白酶解物的制備及功能評價.pdf

1、在海洋中生存的生物為了適應(yīng)海洋的獨(dú)特環(huán)境，如高壓、低營養(yǎng)、高鹽、低溫(特別是深海)、以及高溫(海底火山口附近)等所謂生命極限環(huán)境，在進(jìn)化過程中形成了各自獨(dú)特的生物結(jié)構(gòu)和奇妙的生理功能，為人類提供了眾多結(jié)構(gòu)新穎、功能獨(dú)特和生理活性很強(qiáng)的海洋生物活性物質(zhì)，包括萜類、甾醇類、甙類、多糖、肽類、核酸、蛋白質(zhì)、酶等。其中，蛋白質(zhì)來源廣泛，含量豐富，又有開發(fā)為基因工程藥物的應(yīng)用潛力，因此成為海洋生物活性物質(zhì)研究的熱點(diǎn)。這些蛋白資源除了部分直接食用外

2、，大部分低值的蛋白資源及水產(chǎn)品加工的下腳料或通過壓榨、烘干加工成魚粉，或廢棄掉，產(chǎn)品的附加值很低。因此，對低值的海洋生物蛋白進(jìn)行高值化利用，是當(dāng)前海洋生物技術(shù)急需開展研究的內(nèi)容。其中，運(yùn)用發(fā)酵工程和酶工程技術(shù)，是開發(fā)利用海洋生物蛋白資源的重要途徑。蛋白質(zhì)經(jīng)蛋白酶酶解后，其肽產(chǎn)物具有分子量低，乳化效果好、適熱能力增加、易被機(jī)體吸收和新的生物活性等優(yōu)點(diǎn)，使它們可以被應(yīng)用到許多領(lǐng)域。 本文以海洋蛋白原料(鯊魚、牡蠣、扇貝、中國毛蝦)

3、為研究對象，以四種工具酶(SM97010蛋白酶、SM98011蛋白酶、堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶)進(jìn)行酶解，得到酶解液。對酶解液進(jìn)行蛋白質(zhì)含量分析，氨基酸含量測定。4種海洋蛋白經(jīng)不同的蛋白酶酶解后，酶解液中的總氨基酸含量都有了明顯的提高，而且氨基酸含量均衡，特別是必需氨基酸的含量比較高，其比例明顯高于WHO/FAO標(biāo)準(zhǔn)(35.38％)，都是高營養(yǎng)價值的蛋白源，可以作為高品質(zhì)的飼料添加劑，甚至可以作乳制品的替代品。其中鯊魚肉的風(fēng)味蛋白酶的酶解

4、液中必須氨基酸比例最高(48％)。牡蠣和扇貝的對照組的必需氨基酸與總氨基酸的比值較低，經(jīng)過酶解作用后，該比例大幅上升。 除了必需氨基酸含量較高以外，酶解液中的風(fēng)味氨基酸的含量也很豐富。如谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸等是提供鮮味或甜味的氨基酸，在蛋白酶SM98011和風(fēng)味蛋白酶酶解液中，游離風(fēng)味氨基酸的總含量明顯高于其它兩種蛋白酶的酶解液。說明蛋白酶SM98011和風(fēng)味蛋白酶是酶解海洋蛋白資源開發(fā)海鮮調(diào)味品的較好的工具酶。

5、 蛋白酶SM98011、堿性蛋白酶、SM97010酶解液中的肽比例與對照組相比都有明顯的提高，特別是鯊魚和扇貝經(jīng)過這3種蛋白酶酶解后，其酶解液中的短肽含量明顯增加。說明這3種酶中含有大量的內(nèi)肽酶，可以作為篩選活性肽的工具酶。。 采取小鼠移植性腫瘤病理模型，測定酶解液對小鼠的抑瘤作用和對小鼠胸腺/脾臟的影響，結(jié)果表明，牡蠣和扇貝酶解液抑瘤率較高，能促進(jìn)胸腺增大；鯊魚肉堿性酶解液對腫瘤的抑制作用最低，對胸腺和脾臟沒有促進(jìn)或抑制作用