易激膠囊對腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠VIP和MG表達的影響的實驗研究.pdf

1、目的：通過觀察腹瀉型腸易激綜合征(簡稱IBS)大鼠模型的血漿及其結(jié)腸組織中的血管活性腸肽(簡稱VIP)的表達程度的改變和其盲腸黏膜組織中的肥大細胞(簡稱MC)計數(shù)的變化，來探討中藥易激膠囊的相關(guān)作用機制。
　　 方法：
　　 1.造模：隨機選用60只雄性SD大鼠，體重(160±20)g。應用束縛-制動應激法與化學物質(zhì)灌腸結(jié)腸刺激法相結(jié)合制備腹瀉型腸易激綜合征動物模型。造模過程完成后，對模型組各組大鼠均進行內(nèi)臟神經(jīng)敏感性的

2、評估(腹部回縮反射)，用以評估造模是否成功。
　　 2.動物分組及給藥：造模成功后將實驗大鼠隨機分成6組(正常對照組、模型對照組、西藥治療組、中藥低劑量治療組、中藥中劑量治療組、中藥高劑量治療組)。各組均以10ml/kg等容積灌胃給藥。其中正常對照組和模型對照組均用生理鹽水灌胃，西藥治療組采用濃度為1.8mg/ml的得舒特藥液灌胃，中藥易激膠囊低劑量治療組用濃度為0.225g/ml的易激膠囊藥液灌胃，中藥易激膠囊中劑量治療組用濃

3、度為0.45g/ml的易激膠囊藥液灌胃，中藥易激膠囊高劑量治療組用濃度為0.9g/ml的易激膠囊藥液灌胃。各組灌胃均每天1次，持續(xù)2周。
　　 3.指標檢測：①觀察各組大鼠直腸內(nèi)球囊擴張時它們腹部回縮反射的容量閾值及當擴張量為1.0ml時3min內(nèi)大鼠腹部收縮次數(shù)。②采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(Elisa)檢測大鼠血漿及結(jié)腸黏膜組織中VIP的表達。③通過甲苯胺藍染色法對其盲腸黏膜組織MC染色后，光鏡下計數(shù)10個高倍視野內(nèi)的MC數(shù)。<

4、br>　　 結(jié)果：
　　 1.模型對照組、中藥低劑量治療組、中藥中劑量治療組大鼠引起腹部回縮反射的容量閾值明顯低于正常對照組大鼠，差異顯著(P<0.05)，而西藥治療組、中藥高劑量治療組與正常對照組比較，均無顯著差異(P>0.05)；各個治療組與模型對照組比較，差異顯著(P<0.05)；各中藥治療組與西藥治療組比較，均無顯著差異(P>0.05)。模型對照組、中藥低劑量治療組、中藥中劑量治療組與正常對照組比較，注水量為1.0ml

5、時3min內(nèi)大鼠腹壁反射次數(shù)明顯增高，差異顯著(P<0.05)，而其它各治療組與正常對照組比較，均無顯著差異(P>0.05)；各治療組與模型對照組比較，差異顯著(P<0.05)；各中藥治療組與西藥治療組比較，均無顯著差異(P>0.05)。此結(jié)果表明，易激膠囊對大鼠腸道致敏后所引起的行為學改變起到恢復作用。
　　 2.模型對照組、西藥治療組、中藥低劑量治療組、中藥中劑量治療組與正常對照組比較，大鼠血漿中VIP的含量均差異顯著(P<

6、0.05)，而中藥高劑量治療組與正常對照組比較，大鼠血漿中VIP的含量無顯著差異(P>0.05)；中藥各治療組與模型對照組比較，大鼠血漿中VIP的含量均差異顯著(P<0.05)；各中藥治療組與得西藥治療組比較，大鼠血漿中VIP含量均差異顯著(P<0.05)。此結(jié)果表明各模型組大鼠血漿中的VIP含量較正常對照組均有升高，而易激膠囊能夠明顯降低模型組大鼠血漿中的VIP含量。
　　 3.模型對照組、西藥治療組、各中藥治療組與正常對照組

7、比較，大鼠結(jié)腸組織中VIP的含量均差異顯著(P<0.05)；中藥各治療組與模型對照組比較，大鼠結(jié)腸組織中VIP的含量差異顯著(P<0.05)；各中藥治療組與得西藥治療組比較，大鼠結(jié)腸組織中VIP含量差異顯著(P<0.05)。此結(jié)果表明各模型組大鼠結(jié)腸組織中的VIP含量較正常對照組均有升高，而易激膠囊能夠明顯降低模型組大鼠結(jié)腸組織中的VIP含量。
　　 4.模型對照組、西藥治療組、中藥低劑量治療組、中藥中劑量治療組與正常對照組比較

8、，大鼠盲腸黏膜組織中的MC計數(shù)均差異顯著(P<0.05)，而中藥高劑量治療組與正常對照組比較，大鼠盲腸黏膜組織中的MC計數(shù)無明顯差異(P>0.05)；西藥治療組、中藥中劑量治療組、中藥高劑量治療組與模型對照組比較，大鼠盲腸黏膜組織中的MC計數(shù)均差異顯著(P<0.05)。此結(jié)果表明各模型組大鼠結(jié)腸黏膜組織中的MC計數(shù)較正常對照組均有升高，而易激膠囊和西藥得舒特均能夠明顯降低模型組大鼠結(jié)腸黏膜組織中的MC計數(shù)。
　　 結(jié)論：

9、　　 1.腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠血漿及結(jié)腸組織中VIP含量明顯增高，表明血管活性腸肽(VIP)可能是引發(fā)腸易激綜合征的重要生物活性物質(zhì)。
　　 2.腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠、盲腸黏膜組織中MC計數(shù)明顯增高，表明腸易激綜合征的發(fā)生可能跟MC的增多與活躍相關(guān)。
　　 3.易激膠囊能較明顯提升腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠腹部回縮反射時的容量閾值以及降低單位時間內(nèi)等容量直腸球囊擴張時大鼠腹壁反射次數(shù)。表明易激膠囊能降低腹瀉

10、型腸易激綜合征模型大鼠的內(nèi)臟神經(jīng)高敏感性。
　　 4.易激膠囊能降低腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠血漿和結(jié)腸組織中的VIP含量。表明其治療機制之一可能是通過降低血漿和結(jié)腸組織中的VIP含量，來降低內(nèi)臟神經(jīng)的敏感性，從而降低腸道對外來刺激的敏感性。
　　 5.易激膠囊能降低腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠結(jié)腸黏膜組織中的MC計數(shù)。表明其另外一個治療機制可能是通過減少MC的浸潤和抑制MC的活動，減少相關(guān)生物物質(zhì)的釋放以達到緩解腹痛腹瀉