茶多酚對HPDLFs附著增殖的影響及動物實驗的研究.pdf

1、目的：觀察茶多酚(tea polyphenol，TP)對人牙周膜成纖維細胞(Human periodontalligament fibroblasts cells，HPDLFs)增殖及其在牙根片上附著增殖的影響，摸索出茶多酚作用的最佳時間和濃度，并進行大鼠實驗性牙周炎模型的相關(guān)研究，探討茶多酚對慢性牙周炎的作用機理，為臨床的進一步研究及推廣，提供實驗依據(jù)。 方法：采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)原代HPDLFs并傳代，經(jīng)免疫組化SABC法檢

2、測角蛋白和波形絲蛋白鑒定，取4～6代細胞用于實驗；分組：實驗組按TP濃度由低到高分為0.234375mg/ml組，0.31225mg/ml組，0.46875 mg/ml組，0.625mg/ml組，0.9375mg/ml組，1.25mg/ml組，1.875 mg/ml組，2.5mg/ml組，3.75 mg/ml組和5mg/ml組，共10個濃度組，及空白對照組，溶媒對照組和胰島素樣生長因子(insulin-like growth facto

3、r-Ⅱ，IGF-Ⅱ)對照組；采用細胞計數(shù)法、MTT法、掃描電鏡觀察等方法檢測TP對HPDLFs在牙根片上附著增值的影響。動物實驗采用結(jié)扎絲結(jié)扎和高糖飲食法建立SD大鼠牙周炎模型，分組：實驗組按TP不同濃度分為1.25mg/ml組，2.5mg/ml組，3.75 mg/ml組和5mg/ml組，生理鹽水對照組和甲硝唑?qū)φ战M，每個濃度組的動物均為雌雄各3只，給藥采用牙齦區(qū)局部涂抹，每日3次，4周為1療程。對各組動物行牙齦指數(shù)(GI)、探診深度(

4、PD)、牙齒動度(TM)、牙槽骨吸收值的觀察，測定齦溝液的細菌含量，X線攝片及病理切片來觀測牙周組織的改變。 結(jié)果：MTT結(jié)果顯示不同濃度TP均促進HPDLFs的附著增殖(P<0.05)；溶媒對照組與空白對照組無明顯差異(P>0.05)；相同作用時間下，5mg/ml TP對HPDLFs的作用較IGF顯著(P<0.01)；TP最佳作用時間為6小時，最佳濃度為5mg/ml。掃描電鏡結(jié)果顯示：在TP作用下，大部分HPDLFs在EDTA