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文檔簡介
1、目的:觀察高糖對培養(yǎng)的大鼠晶狀體上皮細胞線粒體活性氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的影響及茶多酚干預后的變化,研究高糖對大鼠晶狀體上皮細胞的影響及茶多酚的干預作用,初步探討糖尿病性白內(nèi)障的發(fā)病機制及茶多酚抗糖尿病性白內(nèi)障的效果。
方法:1、體外培養(yǎng)大鼠晶狀體上皮細胞,加入不同濃度的葡萄糖,模擬體內(nèi)高血糖條件,加入不同濃度茶多酚進行干預,觀察高糖條件下及茶多酚干預后大鼠晶狀體上皮細胞形態(tài)的變化。
2、共聚焦顯微鏡檢測各條件下大鼠晶狀體上皮細
2、胞線粒體活性氧量的變化,分析高糖及茶多酚干預對細胞線粒體活性氧表達的影響。
3、流式細胞儀檢測各條件下大鼠晶狀體上皮細胞線粒體膜電位和細胞死亡率的變化,分析高糖及茶多酚干預對細胞線粒體膜電位、細胞死亡率的影響。
4、免疫細胞化學及免疫熒光化學檢測各條件下大鼠晶狀體上皮細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的表達情況,分析高糖及茶多酚干預對細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的影響。
結(jié)果:1、在高糖條件下的上皮細胞逐漸死亡,數(shù)量明顯減少,傳代后容易老化。而用茶
3、多酚干預的高糖條件的上皮細胞則較好的保持了上皮細胞的形態(tài),未見減少,傳代未見老化。
2、在高糖條件下的上皮細胞線粒體活性氧產(chǎn)生的增多,而應用茶多酚干預組活性氧的產(chǎn)生明顯減少。
3、在高糖條件下的上皮細胞死亡率明顯升高,線粒體膜電位降低;而茶多酚干預組細胞死亡率降低,線粒體膜電位升高。
4、經(jīng)免疫細胞化學和免疫熒光檢測,高糖條件下大鼠晶狀體上皮細胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的陽性率明顯降低,而應用茶多酚干預后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的陽性率明顯
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