2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、背景
   程序性死亡受體-1(programmed death 1, PD-1)是CD28家族中的成員?;罨腡細(xì)胞與B細(xì)胞表達(dá)PD-1。PD-1通過(guò)與程序性死亡受體配體1(programmed death ligand 1, PDL1)或程序性死亡受體配體2(programmed death ligand 2, PDL2)結(jié)合,傳遞抑制性協(xié)同刺激信號(hào)。T細(xì)胞與B細(xì)胞在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病中起重要作用。作為一個(gè)重要的T細(xì)胞與B細(xì)胞

2、活化的負(fù)性調(diào)節(jié)分子,PD-1可能是一個(gè)治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis, RA)的靶點(diǎn)。
   mPDL1-hIg是由小鼠PDL1胞外段與人IgGFc組成的融合蛋白,具有小鼠PDL1的生物活性。由于mPDL1-hIg含有人IgGFc,因而mPDL1-hIg能比較容易地檢測(cè)及純化。而且,mPDL1-hIg中人IgGFc理論上可延長(zhǎng)mPDL1-hIg中小鼠PDL1胞外段的半衰期,有利于mPDL1-hIg中小

3、鼠PDL1胞外段在體內(nèi)發(fā)揮效應(yīng)。
   II膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(Collagen II-induced arthritis, CIA)是廣泛用來(lái)研究人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)關(guān)節(jié)炎模型。
   目的
   在成功構(gòu)建mPDL1-hIg基因真核表達(dá)載體、進(jìn)而獲得穩(wěn)定表達(dá)mPDL1-hIg的CHO細(xì)胞株,從而獲得mPDL1-hIg的基礎(chǔ)上,探討mPDL1-hIg對(duì)CIA的效應(yīng),為探索治療RA提供新思維、新方法以及實(shí)驗(yàn)依

4、據(jù)。
   方法
   ①活化的正常小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞與mPDL1-hIg相互作用后,再與熒光素標(biāo)記的抗人IgG二抗作用,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)活化的正常小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞與mPDL1-hIg的結(jié)合率。
   ②小牛II型膠原2次免疫的小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞經(jīng)過(guò)CFSE染色后,再用變性小牛II型膠原刺激。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)mPDL1-hIg對(duì)變性小牛II型膠原刺激的細(xì)胞增殖的影響,ELISA法檢測(cè)mPDL1-hIg對(duì)變性小

5、牛II型膠原刺激的細(xì)胞表達(dá)IL-17與IL-23的影響。
   ③小牛II型膠原2次免疫小鼠誘導(dǎo)CIA,并將小牛II型膠原免疫小鼠隨機(jī)分成2組:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組小鼠用mPDL1-hIg治療,對(duì)照組小鼠用人IgG治療。從第0天起,每天觀測(cè)小鼠(第二次免疫的時(shí)間確定為第0天)。
   ④在第九天,取mPDL1-hIg治療的CIA小鼠和人IgG治療的CIA小鼠的血清, ELISA法檢測(cè)血清中IL-17與IL-23的表達(dá)。

6、
   ⑤在第九天,取血清后,用頸椎脫位法處死m(xù)PDL1-hIg治療的CIA小鼠和人IgG治療的CIA小鼠,然后迅速剪取腳爪組織,快速置入10%福爾馬林溶液,固定腳爪組織;接著將固定好的腳爪組織移入10% EDTA溶液中脫鈣;脫鈣完成后沖洗、脫水、包埋成蠟塊,最后切片及HE染色。
   ⑥mPDL1-hIg治療的和人IgG治療的CIA小鼠的去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞經(jīng)過(guò)CFSE染色后,再用變性小牛II型膠原刺激,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)mP

7、DL1-hIg治療對(duì)變性小牛II型膠原刺激的CIA小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞增殖的影響,ELISA法檢測(cè)mPDL1-hIg治療對(duì)變性小牛II型膠原刺激的CIA小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞表達(dá)IL-17與IL-23的影響。
   ⑦全部數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,兩組數(shù)據(jù)間差異顯著性檢測(cè)采用U檢驗(yàn)。用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理數(shù)據(jù),p<0.05有顯著性差異。
   結(jié)果
   ①流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示:mPDL1-hIg可

8、與活化的正常小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞結(jié)合;在我們實(shí)驗(yàn)條件下,結(jié)合率約為43.62%。
   ②流式細(xì)胞術(shù)證明:mPDL1-hIg可抑制變性小牛II型膠原刺激的來(lái)源于小牛II型膠原免疫小鼠的去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞增殖;ELISA檢測(cè)結(jié)果表明:mPDL1-hIg可抑制變性小牛II型膠原刺激的來(lái)源于小牛II型膠原免疫小鼠的去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞表達(dá)IL-17與IL-23。
   ③mPDL1-hIg治療可顯著降低小牛II型膠原免疫小鼠的的臨床

9、評(píng)分,盡管發(fā)病率沒有受到影響(實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的發(fā)病率都是6/7(86%))。來(lái)源于mPDL1-hIg治療小鼠和人IgG治療小鼠的腳爪組織切片HE染色后顯示,mPDL1-hIg治療可減輕關(guān)節(jié)病理改變。這些結(jié)果證明,mPDL1-hIg治療可抑制CIA加重,提示:PD-1-PDL途徑涉及CIA的病理機(jī)制。
   ④ELISA檢測(cè)結(jié)果表明:mPDL1-hIg治療可下調(diào)CIA小鼠血清中IL-17與IL-23的表達(dá)。
   ⑤流式細(xì)

10、胞術(shù)證明:mPDL1-hIg治療能夠抑制變性小牛II型膠原刺激的CIA小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞增殖。ELISA檢測(cè)結(jié)果表明:mPDL1-hIg治療能夠抑制變性小牛II型膠原刺激的CIA小鼠去紅細(xì)胞的脾細(xì)胞表達(dá)IL-17與IL-23。這些結(jié)果提示:mPDL1-hIg治療通過(guò)抑制細(xì)胞增殖及IL-17與IL-23的表達(dá)而改善CIA。
   結(jié)論
   mPDL1-hIg可顯著改善CIA,表現(xiàn)在降低臨床評(píng)分、減輕關(guān)節(jié)病理改變及下調(diào)血

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