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1、微生物體中存在著控制和應(yīng)答溶氧水平的敏感體系,該體系通過(guò)改變微生物的生長(zhǎng)狀態(tài)維持穩(wěn)定的溶氧水平.已知透明顫菌在貧氧環(huán)境中能大量合成血紅蛋白(VHb)以適應(yīng)其在貧氧環(huán)境中生存,目前該蛋白的基因已經(jīng)被克隆到多種異源生物體內(nèi),并促進(jìn)了異源生物體在微氧條件下的生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)的合成能力.該研究是將透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)克隆到蘇云金桿菌(Bacillusthuringiensis,Bt)HBF-1和大腸桿菌中,研究該基因?qū)μK云金桿菌和大腸桿菌
2、生長(zhǎng)的促進(jìn)作用.為了使vgb基因在蘇云金桿菌中高效表達(dá),該研究采用革蘭氏陰性菌與革蘭氏陽(yáng)性菌的穿梭質(zhì)粒pMK4作為載體,果聚蔗糖酶基因(sacB)作為啟動(dòng)子,構(gòu)建了含有果聚糖酶基因sacB啟動(dòng)子和vgb基因的重組質(zhì)粒pMK-SV.創(chuàng)造性地采用原生質(zhì)體電轉(zhuǎn)化的方法,將pMK-SV轉(zhuǎn)入蘇云金桿菌中,經(jīng)影印篩選得到了轉(zhuǎn)化子Bt4.對(duì)Bt4誘導(dǎo)表達(dá),與原菌株相比Bt4的生長(zhǎng)量增加了20.2%.為了將含有天然啟動(dòng)子的vgb基因克隆到pMK4中,該
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