蛇石足杉內(nèi)生真菌Slf-14及藜蒿中黃酮苷類化學(xué)成分研究.pdf

1、蛇足石杉(Huperziaserrata),又名救命王、千層塔、蛇足草,屬石松目石杉科石杉屬多年生草本蕨類植物,是一種傳統(tǒng)中草藥。其植物組織內(nèi)存在大內(nèi)生真菌。研究表明,內(nèi)生真菌Slf-14發(fā)酵培養(yǎng)能產(chǎn)生石杉?jí)A甲等生物堿化學(xué)成分,對(duì)乙酰膽堿酶具有可逆,高效,高選擇性的抑制活性,其發(fā)酵培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基為PD培養(yǎng)基,培養(yǎng)量為150mL,培養(yǎng)溫度為28℃,培養(yǎng)速率為120r/min。發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)生菌絲體和發(fā)酵液,分別用石油醚、氯仿與乙酸乙酯依次萃

2、取,得到石油醚萃取部分、氯仿萃取部分與乙酸乙酯萃取部分,以硫代乙酰膽堿(ATCh)為底物,5,5-二硫代-2-硝基苯甲酸(DTNB)為顯色劑,通過(guò)DTNB顯色法檢測(cè)其菌絲體與發(fā)酵液不同萃取部分乙酰膽堿酯酶抑制活性。結(jié)果表明菌絲體氯仿萃取部分抑制活性最高。采用紫外分光光度法,以氯仿為參比,檢測(cè)波長(zhǎng)為313nm,測(cè)定內(nèi)生真菌Slf-14菌絲體中總生物堿含量。
　　 為進(jìn)一步闡明內(nèi)生真菌Slf-14菌絲體乙酰膽堿酯酶抑制活性的物質(zhì)基礎(chǔ)

3、和作用機(jī)理,本研究采用乙醇提取,分布多次萃取和反相硅膠柱層析等多種柱層析法對(duì)菌絲體氯仿萃取部分進(jìn)行多次分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定研究,得到其中的主要化學(xué)成分。
　　 本研究首次對(duì)內(nèi)生真菌Slf-14發(fā)酵產(chǎn)生的菌絲體與發(fā)酵液的不同萃取部分對(duì)乙酰膽堿酶的抑制活性進(jìn)行篩選與研究,確定了菌絲體萃取部分的乙酰膽堿酶抑制活性最高,并對(duì)其進(jìn)行分離純化與初步化學(xué)成分研究,為具體闡明乙酰膽堿酶抑制活性的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機(jī)理提供了初步理論依據(jù)。
　　

4、 藜蒿(ArtemisiaselengensisTurcz)學(xué)名蔞蒿,是菊科蒿屬多年生草本植物,其植物組織內(nèi)含有大量的黃酮類物質(zhì),具有降低心肌耗氧量、使冠脈和腦血管流量增加、降血糖和血脂等作用及具有清除人體中超氧離子自由基、抗衰老、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等生理活性。為了進(jìn)一步闡明藜蒿中所含黃酮苷類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu),對(duì)鄱陽(yáng)湖野生藜蒿中黃酮苷類化合物進(jìn)行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定研究,采用超聲波輔助溶劑提取法提取藜蒿中的化學(xué)成分,并通過(guò)聚酰胺柱層析法分離藜

5、蒿中的黃酮苷元與黃酮苷類化合物以及采用SephadexLH-20葡聚糖凝膠柱色譜法分離純化藜蒿中的黃酮苷類單體化合物,根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜特征鑒定化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。研究表明,藜蒿提取物中的黃酮苷元和黃酮苷類化合物得到較好的分離,同時(shí)分離并鑒定了兩個(gè)黃酮苷類的單體化合物,分別為柯依利素.7-O-β-D-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-β-D-木糖苷。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用超聲波輔助溶劑提取并結(jié)合聚酰胺柱層析可以充分提取并有效分離藜蒿提