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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
將米諾環(huán)素作為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stem cell,BMSC)移植治療大鼠實(shí)驗(yàn)性脊髓損傷的前期治療和伴隨治療,來(lái)研究其是否可以為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植發(fā)揮更好治療作用創(chuàng)造有利的條件。
實(shí)驗(yàn)材料與方法:
一、實(shí)驗(yàn)材料
試驗(yàn)用細(xì)胞株:表達(dá)綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞株(Cyagen賽業(yè)
2、廣州生物科技有限公司)。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:成年健康成熟SD雄性大鼠48只,體重200~250g,由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
鹽酸米諾環(huán)素膠囊(惠氏公司)、NF-200小鼠抗大鼠單克隆抗體(武漢博士德)、SABC免疫組化試劑盒、DAB顯色系統(tǒng)(武漢博士德)。
二、實(shí)驗(yàn)方法
將48只成年SD大鼠按Nystrom法造成重復(fù)性好的T10至T11節(jié)段脊髓急性損傷模型;隨機(jī)分成四組:損傷組、米
3、諾環(huán)素組、BMSC組及聯(lián)合治療組;將帶有GFP基因的SD大鼠BMSC進(jìn)行局部移植并將米諾環(huán)素經(jīng)口給藥輔助干細(xì)胞移植治療。分別行BBB評(píng)分、HE染色、熒光顯微鏡細(xì)胞計(jì)數(shù)及免疫組化染色來(lái)判斷不同治療方法的療效。
三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,兩組間差異由t檢驗(yàn)檢測(cè),多組間差異采用單方向方差分析,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
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