胰島素在大鼠脊髓損傷治療中的實驗研究.pdf

1、目的：觀察胰島素對大鼠急性脊髓損傷是否具有治療作用及其可能的作用機理。 方法：60只健康的8～10周SD大鼠，體重200～250克，雌雄不限，隨機分為A組(損傷對照組)和B組(胰島素組)，每組各30只大鼠，根據(jù)改良Allen法，將T8-10椎板全部咬除，暴露硬脊膜，在硬脊膜表面放置-4×3.0mm大小的曲度與脊髓表面弧度相似的銅制墊片，用5g重物在玻璃試管的引導下從8cm高處垂直自由落下，打擊墊片，形成致傷力為40gcf，建立中

2、等脊髓損傷模型，B組給與11u/kg的胰島素，一日三次腹腔灌注，連續(xù)七天，A組給與等量同次數(shù)的生理鹽水腹腔灌注，在傷后8h、第3天、第7天、第14天、第28天，用4％多聚甲醛灌注固定傷段的脊髓，常規(guī)石蠟包埋切片，用Tunel法觀察脊髓的細胞凋亡情況，從而了解脊髓的繼發(fā)損傷的變化，在第1天、第3天、第7天、第14天、第28天采用Nissl染色觀察尼氏體和神經元數(shù)量的變化，應用免疫組織化學檢測脊髓的GAP-43陽性表達的情況，以了解脊髓神經

3、的恢復和生長情況，在動物行為恢復評價方面，我們采用BBB評分標準來評價。 結果：B組脊髓神經的尼氏體在脊髓損傷后的崩解及恢復均好于A組，神經元數(shù)量在多個時相點也要好于A組(P＜0.05或P＜0.01)，胰島素能促進脊髓在脊髓損傷后的GAP-43陽性表達，在脊髓損傷后第一天，GAP-43陽性細胞就開始出現(xiàn)，損傷后第七天陽性細胞數(shù)達到高峰，以后逐漸下降，而尤其是對照組下降迅速，在第3天，第7天，第14天這三個時間點，胰島素組較損傷對

4、照組陽性細胞數(shù)多且著色深，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或P＜0.01)。脊髓損傷后8h凋亡細胞即出現(xiàn)，在在第7天時，陽性細胞表達達高峰，以后逐漸下降，在第28天時，凋亡的陽性細胞已很少有表達，但在8h、3天、7天、14天時， B組的凋亡細胞明顯少于A組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或P＜0.01)。在動物后肢行為恢復方面，損傷后大鼠的后肢功能在A組及B組均逐漸有恢復，在第3天時，兩組BBB得分有差異，B組(胰島素組)得分大于損傷對照