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文檔簡介
1、近幾十年來養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展迅速,而蟹類養(yǎng)殖技術(shù)和對疾病的研究卻相對滯后,造成蟹類暴發(fā)病流行而無法控制的現(xiàn)象。本實驗室于2004年11月珠海鋸緣青蟹暴發(fā)病時采樣,發(fā)現(xiàn)了一種類呼腸孤病毒,該病毒是導致蟹類暴發(fā)病流行的主要病毒。對該病毒進一步的研究,以便指導蟹類的健康養(yǎng)殖。本文對該病毒主要進行如下三個方面的研究:用人工感染和RT—PCR檢測技術(shù)對自然海區(qū)常見生物種及其鋸緣青蟹養(yǎng)殖池周圍相關的生物進行調(diào)查,確定病毒的宿主范圍和敏感宿主。通過人工感染
2、的方法,用RT一PCR方法檢測證實凡納濱對蝦(Litopenaeusvannamei)、日本囊對蝦(MarsupenaeusJaponicus)、脊尾白蝦(Palaemoncarincauda)、羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergii)、克氏螯蝦(Procambiusclarkii)、日本蟳(Charybdisjaponica)、河口溪蟹(P.hokuoense)、中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)不是
3、該病毒的自然宿主,直額絨螯蟹(Eriocheirrecta)是該病毒的自然宿主,但不能確定是否為敏感宿主。養(yǎng)殖池內(nèi)的浮游植物、浮游動物、脊尾白蝦(Palaemoncarincauda)、彈涂魚(Periophthalmuscantonensis)、鰕虎魚(Acentrogobius),養(yǎng)殖池周圍的野生蟹—螃蜞(Sesarmasp.)、日本蟳(Charybdisjaponica),養(yǎng)殖過程中常用的餌料—白鷴(Lophuranyctheme
4、ra),天然海區(qū)中常見的生物種—三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)、口蝦姑(Oratosquillaoratoria)、翡翠貽貝(Mytilussmaragdinuschemnitz)、牡蠣(Ostrea)、紅樹蜆(Geloinacoaxans),通過RT—PCR檢測其攜帶類呼腸孤病毒的情況,結(jié)果顯示,所采集的樣品都沒有檢測到攜帶該病毒。通過對類呼腸孤病毒進行不同溫度處理后注射感染鋸緣青蟹,結(jié)果顯示,該類呼腸孤
5、病毒在40℃、50℃、60℃溫浴半小時后病毒都沒有完全失活,但感染活性隨著處理溫度的升高而降低,青蟹的死亡高峰期都有推遲,70℃溫浴30min后感染活性降低了約20%,只有在80℃溫浴30min后該病毒才完全失活;在4℃至少可以保存6個月,其感染活性基本沒有影響。通過不同濃度的甲醛、高錳酸鉀、次氯酸鈉、碘對新呼腸孤病毒進行處理后,對鋸緣青蟹進行浸泡感染,結(jié)果表明,甲醛在濃度為100ppm、20ppm時,對該類呼腸孤病毒都沒有顯著的滅活作
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