葡萄籽原花青素體外活性和藥效學(xué)及藥物代謝動力學(xué)研究.pdf

1、葡萄籽原花青素(GSPE)是一種天然植物多酚，隨著對葡萄籽原花青素的性質(zhì)和藥理活性的深入研究，其已廣泛應(yīng)用于保健食品、醫(yī)藥及化妝品領(lǐng)域并逐步受到人們的青睞。本實驗通過對GSPE的四個分段產(chǎn)物進(jìn)行體外抗氧化活性檢測，從中篩選出活性較高的分段產(chǎn)物，并對其體外性質(zhì)、藥效學(xué)和藥物代謝動力學(xué)等方面進(jìn)行系統(tǒng)研究，明確其作用機(jī)理，對于深入認(rèn)識其藥用價值和作用機(jī)理，并加速其臨床應(yīng)用具有重要的理論意義和實用價值。
　　 本研究首先對葡萄籽原花青素

2、提取物四個分段產(chǎn)物進(jìn)行體外抗氧化活性的評價，通過檢測并比較葡萄籽提取物四種分段產(chǎn)物及陽性對照VitC對總抗氧化能力和對兩種具有代表性的氧自由基02-·和DPPH·的清除能力，評價其體外抗氧化活性，篩選出抗氧化作用最強(qiáng)的GSPE，其抗氧化活性高于VitC，是一種具有潛在開發(fā)價值和藥用研究價值的強(qiáng)效抗氧化劑，并將其用于后續(xù)研究。
　　 其次，對GSPE進(jìn)行了藥效學(xué)研究，研究了GSPE對腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，并初步探討了其作用機(jī)

3、制。本研究將實驗大鼠分為假手術(shù)組、模型組、葡萄籽原花青素高（250mg·kg-1）、中(150mg·kg-1)、低(50 mg·kg-1)三個治療組共5組，利用線栓法建立穩(wěn)定的、可重復(fù)的局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠模型，考察GSPE對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型的保護(hù)作用及其機(jī)制。結(jié)果顯示葡萄籽原花青素可明顯改善大鼠神經(jīng)功能缺損和病理改變并縮小梗死灶的范圍；對缺血側(cè)腦組織中反映氧化應(yīng)激狀態(tài)的SOD、GSH、LDH、MDA等各項指標(biāo)均能有

4、不同程度的改善，且具有一定的劑量依賴關(guān)系。這說明GSPE對大鼠腦缺血再灌注損傷的改善作用可能是通過緩解氧化應(yīng)激的方式來實現(xiàn)的，為腦缺血再灌注損傷性疾病的機(jī)制和治療等方面的研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 再次，建立了用于GSPE中主要物質(zhì)原花青素B2(PCB2)檢查和含量測定的高效液相色譜法?？疾炝斯?、熱、濕三個影響因素對GSPE穩(wěn)定性的影響，以外觀性狀、PCB2含量和總抗氧化能力為指標(biāo)，對GSPE的穩(wěn)定性進(jìn)行評價，實驗結(jié)果表明GSPE原

5、料藥穩(wěn)定性差，溫度、濕度和光照均對其穩(wěn)定性有較大影響，長期貯存的過程中應(yīng)注意低溫避光干燥；鑒于上述結(jié)果，對GSPE進(jìn)行劑型方面的探索并研制出了GSPE微丸以期對其穩(wěn)定性有所改善，GSPE微丸經(jīng)過6個月的加速試驗，外觀性狀、PCB2含量和抗氧化能力都有了較大的改變，說明經(jīng)過劑型摸索的GSPE微丸穩(wěn)定性方面依然需要進(jìn)一步的加強(qiáng)。這些結(jié)果為GSPE原料藥的貯存、包裝和制劑研發(fā)等提供必不可少的研究資料。
　　 最后，建立定量測定血漿樣品

6、中GSPE的高效液相色譜-串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜分析方法并將該方法應(yīng)用于GSPE在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)研究，結(jié)合DAS2.1.1軟件分析所得藥物動力學(xué)參數(shù)，對葡萄籽原花青素在大鼠體內(nèi)的代謝情況和生物利用度以及卡波普對生物利用度是否有改善進(jìn)行探討。結(jié)果表明GSPE的主要成分PCB2的達(dá)峰時間Tmax為45min，生物利用度只有4.62％，而卡波普對生物利用度沒有明顯的改善作用。以上結(jié)果為GSPE的臨床應(yīng)用和制劑設(shè)計提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，對其藥用