葡萄籽原花青素體外活性和藥效學及藥物代謝動力學研究.pdf

1、葡萄籽原花青素(GSPE)是一種天然植物多酚，隨著對葡萄籽原花青素的性質和藥理活性的深入研究，其已廣泛應用于保健食品、醫(yī)藥及化妝品領域并逐步受到人們的青睞。本實驗通過對GSPE的四個分段產(chǎn)物進行體外抗氧化活性檢測，從中篩選出活性較高的分段產(chǎn)物，并對其體外性質、藥效學和藥物代謝動力學等方面進行系統(tǒng)研究，明確其作用機理，對于深入認識其藥用價值和作用機理，并加速其臨床應用具有重要的理論意義和實用價值。
　　 本研究首先對葡萄籽原花青素

2、提取物四個分段產(chǎn)物進行體外抗氧化活性的評價，通過檢測并比較葡萄籽提取物四種分段產(chǎn)物及陽性對照VitC對總抗氧化能力和對兩種具有代表性的氧自由基02-·和DPPH·的清除能力，評價其體外抗氧化活性，篩選出抗氧化作用最強的GSPE，其抗氧化活性高于VitC，是一種具有潛在開發(fā)價值和藥用研究價值的強效抗氧化劑，并將其用于后續(xù)研究。
　　 其次，對GSPE進行了藥效學研究，研究了GSPE對腦缺血再灌注損傷的保護作用，并初步探討了其作用機

3、制。本研究將實驗大鼠分為假手術組、模型組、葡萄籽原花青素高（250mg·kg-1）、中(150mg·kg-1)、低(50 mg·kg-1)三個治療組共5組，利用線栓法建立穩(wěn)定的、可重復的局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠模型，考察GSPE對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型的保護作用及其機制。結果顯示葡萄籽原花青素可明顯改善大鼠神經(jīng)功能缺損和病理改變并縮小梗死灶的范圍；對缺血側腦組織中反映氧化應激狀態(tài)的SOD、GSH、LDH、MDA等各項指標均能有

4、不同程度的改善，且具有一定的劑量依賴關系。這說明GSPE對大鼠腦缺血再灌注損傷的改善作用可能是通過緩解氧化應激的方式來實現(xiàn)的，為腦缺血再灌注損傷性疾病的機制和治療等方面的研究奠定了基礎。
　　 再次，建立了用于GSPE中主要物質原花青素B2(PCB2)檢查和含量測定的高效液相色譜法。考察了光、熱、濕三個影響因素對GSPE穩(wěn)定性的影響，以外觀性狀、PCB2含量和總抗氧化能力為指標，對GSPE的穩(wěn)定性進行評價，實驗結果表明GSPE原

5、料藥穩(wěn)定性差，溫度、濕度和光照均對其穩(wěn)定性有較大影響，長期貯存的過程中應注意低溫避光干燥；鑒于上述結果，對GSPE進行劑型方面的探索并研制出了GSPE微丸以期對其穩(wěn)定性有所改善，GSPE微丸經(jīng)過6個月的加速試驗，外觀性狀、PCB2含量和抗氧化能力都有了較大的改變，說明經(jīng)過劑型摸索的GSPE微丸穩(wěn)定性方面依然需要進一步的加強。這些結果為GSPE原料藥的貯存、包裝和制劑研發(fā)等提供必不可少的研究資料。
　　 最后，建立定量測定血漿樣品

6、中GSPE的高效液相色譜-串聯(lián)三重四級桿質譜分析方法并將該方法應用于GSPE在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學研究，結合DAS2.1.1軟件分析所得藥物動力學參數(shù)，對葡萄籽原花青素在大鼠體內(nèi)的代謝情況和生物利用度以及卡波普對生物利用度是否有改善進行探討。結果表明GSPE的主要成分PCB2的達峰時間Tmax為45min，生物利用度只有4.62％，而卡波普對生物利用度沒有明顯的改善作用。以上結果為GSPE的臨床應用和制劑設計提供準確的數(shù)據(jù)，對其藥用