Atorvastatin對大鼠VSMCs myocardin mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:Myocardin是一種對平滑肌細(xì)胞分化起決定作用的細(xì)胞因子之一。目前研究認(rèn)為myocardin通過與SRF(serum response factor)的協(xié)同作用,促使平滑肌特異性基因的表達(dá)。Myocardin表達(dá)的升高或降低可引起血管平滑肌的分化或去分化,最終導(dǎo)致血管的病理性改變。氯化鉀可引起細(xì)胞外鈣內(nèi)流,從而激活Rho信號通路來促進(jìn)myocardin mRNA的表達(dá)。阿托伐他汀(Atorvastatin,ATV)是HMG-C

2、oA(Hydroxymethylglutaryl-CoA)還原酶抑制劑,是臨床應(yīng)用廣泛的降血脂藥物。ATV在無明顯降低血脂的情況下對心血管具有保護(hù)作用,但機(jī)制尚不清楚。ATV是否通過影響血管平滑肌細(xì)胞myocardin的表達(dá)從而對心血管具有保護(hù)作用尚不清楚。因此,我們擬對血管平滑肌細(xì)胞中ATV與myocardin表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行研究,同時(shí)探討了阿托伐他汀(ATV)、氯化鉀(KCl)或轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth

3、 factor β1,TGF-β1)、二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide, DMS0)對myocardin表達(dá)的影響。 方法：通過組織塊培養(yǎng)發(fā)法獲得大鼠原代平滑肌細(xì)胞(SMC),培養(yǎng)至5-8代用于實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)前,SMC先在DMEM/F12(0.5％FBS,(100U/ml青霉素,100 mg/ml鏈霉素)培養(yǎng)基中饑餓三天,隨后用ATV,KCl,TGF-β1,DMSO處理,采用實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)(Real-ti

4、me Polymerase chain reaction, Real-time PCR)方法檢測SMC中myocardin的mRNA表達(dá)量。 結(jié)果:KCl(60 mM)及TGF-β1(10 ng/ml)對myocardin mRNA表達(dá)無影響(KCl 0.73±0.06,TGF-β1:0.68±0.06 VS control：0.78±0.13,P>0.05,n=7),另外,DMSO也不影響myocardin mRNA的表達(dá)。在

5、DMSO存在的情況下,不管是KCl還是TGF-β1均不刺激myocardin的表達(dá)。單獨(dú)ATV處理也不影響myocardin的表達(dá),A1W和KCl(不是TGF-β1)協(xié)同作用則明顯地刺激myocardin的表達(dá)(ATV+KCl: 1.54±0.18 VS DMSO+KCl: 0.66±0.11,P<0.01,n=7)。 結(jié)論： 1.在平滑肌細(xì)胞生長數(shù)量達(dá)70％時(shí),KCl,TGF-β1,DMSO對myocardinmRNA