有機(jī)錫對(duì)熱帶爪蟾基因mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、近年來(lái)，全球兩棲類動(dòng)物種群衰退現(xiàn)象十分嚴(yán)重，已有研究表明與環(huán)境污染物有關(guān)。有機(jī)錫是目前已知內(nèi)分泌干擾物質(zhì)(EDCs)中應(yīng)用最廣的金屬化合物，TBT也是人為引入水環(huán)境最毒的化學(xué)物質(zhì)之一。兩棲類變態(tài)實(shí)驗(yàn)(AMA)被認(rèn)為是檢測(cè)甲狀腺激素干擾作用簡(jiǎn)單而特異的方法，這一方法是在爪蟾蝌蚪變態(tài)期間，通過(guò)形態(tài)學(xué)和組織學(xué)等指標(biāo)對(duì)污染物是否具有甲狀腺激素干擾效應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。而本論文采用分子指標(biāo)，研究了有機(jī)錫化合物對(duì)熱帶爪蟾蝌蚪和胚胎發(fā)育過(guò)程中相關(guān)基因mRNA

2、表達(dá)的變化，并探討了甲狀腺激素干擾效應(yīng)及可能的作用機(jī)制。
　　 首先，用50和200 ng·L-1的TBT對(duì)熱帶爪蟾NF51階段蝌蚪進(jìn)行48和96 h暴露。結(jié)果表明，TBT能引起蝌蚪多個(gè)甲調(diào)基因表達(dá)的變化，但基因的表達(dá)具有明顯的組織差異性。這些基因涉及到甲狀腺激素的合成、運(yùn)輸、轉(zhuǎn)化和代謝等多個(gè)過(guò)程，表明TBT對(duì)爪蟾具有甲狀腺激素干擾效應(yīng)。同時(shí)，通過(guò)對(duì)一些相關(guān)基因的檢測(cè)表明TBT可能通過(guò)與RXR結(jié)合而對(duì)蝌蚪產(chǎn)生甲狀腺激素干擾效應(yīng)。

3、
　　 其次，TBT對(duì)熱帶爪蟾胚胎進(jìn)行24、48和72 h三個(gè)不同時(shí)間段的暴露，結(jié)果表明，TBT能引起胚胎多個(gè)不同基因表達(dá)的變化。這些基因涉及到甲調(diào)信號(hào)途徑，頭部發(fā)育和神經(jīng)脊細(xì)胞遷移途徑等多個(gè)過(guò)程，表明TBT影響了爪蟾胚胎發(fā)育過(guò)程。同時(shí)，通過(guò)對(duì)一些甲調(diào)基因及其相關(guān)基因的檢測(cè)，從分子水平上說(shuō)明TBT在爪蟾胚胎期也具有甲狀腺激素干擾效應(yīng)。一些胚胎發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的異常，影響了胚胎發(fā)育，導(dǎo)致胚胎畸形。
　　 最后，用0.2、1

4、和5μg·L-1TPT對(duì)熱帶爪蟾胚胎進(jìn)行72 h時(shí)間暴露。結(jié)果表明，TPT能引起胚胎尾部多個(gè)不同基因mRNA表達(dá)的變化，初步探討了TPT引起的胚胎尾部畸形的分子機(jī)制，F(xiàn)oxd3異常表達(dá)，可誘導(dǎo)體軸異常，胚胎尾巴彎曲現(xiàn)象可能與其有關(guān)。但是，所做基因有限，還需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來(lái)研究其致畸機(jī)制，揭示如鰭為什么變窄等畸形現(xiàn)象。
　　 本論文通過(guò)多個(gè)實(shí)驗(yàn)研究了有機(jī)錫化合物對(duì)熱帶爪蟾蝌蚪期和胚胎期相關(guān)基因表達(dá)的變化，從分子水平上證明了有機(jī)錫化合