水稻化學(xué)誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的建立.pdf

1、化學(xué)誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)對植物功能基因研究及植物基因工程應(yīng)用有重要意義。迄今為止，植物分子生物學(xué)家們已建立了一些化學(xué)誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)，如高效、嚴(yán)格依賴β-雌二醇誘導(dǎo)的XVE植物表達(dá)系統(tǒng)。另一方面，這些系統(tǒng)大多都局限于雙子葉植物，如擬南芥，煙草等。對于單子葉植物，如水稻，雖有文獻(xiàn)報(bào)道相關(guān)誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)，但由于化學(xué)誘導(dǎo)物質(zhì)在水稻中的運(yùn)輸存在障礙，難以實(shí)際應(yīng)用于水稻功能基因的研究。鑒于此，本研究對水稻中XVE系統(tǒng)應(yīng)答β-雌二醇誘導(dǎo)的模式進(jìn)行了研究，同時(shí)結(jié)合

2、高效位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)的應(yīng)用，以期建立一個(gè)實(shí)用型的水稻誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)。以GUS為報(bào)告基因，通過轉(zhuǎn)基因愈傷及水稻植株的分析表明：在水稻離體組織中，XVE系統(tǒng)能嚴(yán)謹(jǐn)調(diào)控外源基因的表達(dá)；XVE誘導(dǎo)系統(tǒng)與位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)結(jié)合，能夠特異性介導(dǎo)外源基因片段在水稻中刪除；改造型XVE-位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)介導(dǎo)的刪除效率更高，能夠?qū)崿F(xiàn)對水稻植株中基因表達(dá)或RNA干擾的調(diào)控。這一系統(tǒng)可以用于水稻功能基因的研究，同時(shí)也可用于高效率培育無選擇標(biāo)記轉(zhuǎn)基因水稻植株