褐飛虱和灰飛虱幾丁質(zhì)合成酶及其兩個(gè)可變外顯子的研究.pdf

1、幾丁質(zhì)合成酶（CHS）在昆蟲(chóng)表皮及其它合成幾丁質(zhì)的組織中發(fā)揮著重要的作用。在本研究中，通過(guò)RT-PCR和3'-RACE方法克隆得到了兩種稻飛虱—褐飛虱及灰飛虱CHS的eDNA序列。通過(guò)系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析，兩者都屬于CHS1。據(jù)目前的報(bào)道，大部分昆蟲(chóng)都有兩種類(lèi)型的CHS（CHS1和CHS2），但通過(guò)褐飛虱基因組和轉(zhuǎn)錄組的研究分析和驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)褐飛虱僅存在一個(gè)CHS-CHS1。不論是褐飛虱還是灰飛虱CHS1中都存在兩個(gè)可變剪切，產(chǎn)生兩個(gè)轉(zhuǎn)錄本（CH

2、S1a和CHS1b），在褐飛虱中位于外顯子19a和19b，而且通過(guò)對(duì)7種昆蟲(chóng)基因組結(jié)構(gòu)的比較發(fā)現(xiàn)，除了蚜蟲(chóng)之外都含有兩個(gè)可變剪切。褐飛虱可變外顯子a在剛蛻皮的時(shí)候相對(duì)轉(zhuǎn)錄水平最高，外顯子b通常在蛻皮前1-2天達(dá)到最高。通過(guò)顯微注射的方法對(duì)褐飛虱進(jìn)行RNAi實(shí)驗(yàn)，不論是沉默CHS1，CHSa和CHSb，都能下調(diào)其轉(zhuǎn)錄水平，并產(chǎn)生了隨后的表型。沉默CHS1和CHSa產(chǎn)生了畸形致死的表型，而沉默CHS1b雖然導(dǎo)致死亡率有所上升，但沒(méi)有被觀(guān)察到