聚卟啉鐵整體柱的制備及其色譜性能研究.pdf

1、作為細胞中的活性大分子，蛋白質是與疾病相關的主要分子，蛋白表達水平的改變與疾病直接相關。因此研究如何對蛋白質進行分離、鑒定，是一項具有重要意義的工作。 整體柱具有制備方法簡單、通透性好等特點，已被較廣泛的用作高效液相色譜固定相，用于蛋白質的分離、分析中。通過兩種聚合方式制備了兩種聚卟啉鐵整體柱，并分別以其為固定相，通過高效液相色譜法對幾種標準蛋白質和幾種實際生物樣品進行了成功分離。
　　本文首先通過原位自由基聚合方式，以卟啉鐵（H

2、emin）、甲基丙烯酸縮水甘油酯（GMA）作為二元單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯（EDMA）作為交聯(lián)劑，1,4-丁二醇、丙醇、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）為致孔劑，偶氮二異丁腈（AIBN）為引發(fā)劑，制備得到聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整體柱。通過掃描電鏡、紅外光譜法、氮吸附-脫附法和壓汞法等方法對得到的整體柱進行了表征。將該整體柱用作高效液相色譜的固定相，在8分鐘內對三種標準蛋白進行了成功分離；此外，還分離了雞卵清以及細

3、胞色素C的酶解液，結果表明卟啉鐵的加入增強了該整體柱對蛋白質的選擇性，對實際蛋白質樣品具有一定的分離能力。其次，為了改善整體柱孔結構的均勻性并提升其對蛋白質的選擇性，采用活性-可控的原子轉移自由基聚合法（atom transfer radical polymerization, ATRP）制備了聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整體柱。利用該整體柱對幾種標準蛋白進行了成功分離。此外，還分別對人血漿及蝸牛酶進行了分離。結果表明