強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血CD8+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平變化及臨床意義.pdf

1、目的:通過(guò)比較CD8+CD122+T、CD4+CD25+T和CD8+CD28-T細(xì)胞在強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis, AS）患者和健康對(duì)照外周血的表達(dá)差異情況，分析與相關(guān)的細(xì)胞因子IL-2, IL-10, IL-15, TGF-β1及TNF-ɑ的相互作用，結(jié)合AS臨床特征，從而探討 AS患者外周血 CD8+調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞(Regulatory T cell,Treg)水平變化及臨床意義，從而為CD8+Tre

2、g細(xì)胞與AS的關(guān)聯(lián)性研究提供線索。
　　方法：采用病例對(duì)照研究設(shè)計(jì)的方法，收集2015年12月至2016年8月期間來(lái)安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院確診的40名AS患者作為病例，同時(shí)收集40名與AS患者年齡和性別相匹配的健康人群作為對(duì)照。根據(jù)病程是否超過(guò)12個(gè)月將病人劃分為短病程AS組和長(zhǎng)病程AS組，同時(shí)收集患者的用藥情況，并根據(jù)非甾體類抗炎藥物（Non-steroidal anti-Inflammatory drugs, NSAIDs）

3、使用情況和生物制劑使用情況進(jìn)行分組分析。采集病例和對(duì)照5 ml靜脈血，分離血漿和外周血單個(gè)核細(xì)胞，同時(shí)運(yùn)用自行設(shè)計(jì)的流行病學(xué)調(diào)查問(wèn)卷收集患者相關(guān)的流行病學(xué)資料。運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)病例組和對(duì)照組患者外周血 CD8+CD122+ T、CD4+CD25+T、CD8+CD28-T和CD4+CD28-T細(xì)胞百分率，并運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定病例組和對(duì)照組患者血漿中細(xì)胞因子IL-2、IL-10、IL-15、TGF-β1及TNF-ɑ的濃度。比較各指標(biāo)在

4、病例組和對(duì)照組之間以及短病程 AS組和長(zhǎng)病程AS組之間的表達(dá)差異，并分析 T細(xì)胞同患者相關(guān)臨床特征以及細(xì)胞因子之間的相關(guān)性。根據(jù)數(shù)據(jù)資料的分布情況，服從正態(tài)分布的連續(xù)性資料的描述采用均數(shù)（標(biāo)準(zhǔn)差），組間比較采用Student’s t檢驗(yàn)；不服從正態(tài)分布的資料的描述采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距），組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。兩組數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性分析根據(jù)數(shù)據(jù)滿足的條件，滿足正態(tài)分布雙變量采用 Pearson積距相關(guān)分析，不滿足

5、雙變量正態(tài)分布的兩組數(shù)據(jù)采用Spearman秩相關(guān)分析。本次實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)水準(zhǔn)設(shè)為雙側(cè)0.05。所有的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS16.0軟件，作圖采用GraphPad Prism5.0軟件。
　　結(jié)果：在T細(xì)胞百分率水平比較上，CD4+CD25+T和 CD8+CD122+T細(xì)胞表達(dá)百分率水平在AS患者外周血中的表達(dá)明顯高于年齡和性別匹配的健康對(duì)照（t=2.066, P=0.042; Z=-4.917, P=0.001），其中CD4+CD2

6、5+T細(xì)胞在長(zhǎng)病程病人中升高的水平相對(duì)于短病程病人更為顯著；血漿IL-2、IL-10、IL-15、TGF-β1及TNF-ɑ的濃度在病例組和對(duì)照組中的差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Treg細(xì)胞同血漿細(xì)胞因子之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的相關(guān)性。CD4+CD25+T、CD8+CD122+T、CD8+CD28- T和CD4+CD28- T細(xì)胞百分率水平在是否使用生物制劑的兩組AS患者中均不存在表達(dá)差異；而在是否使用 NSAIDs的兩組 AS患者分組分析發(fā)

7、現(xiàn)，CD4+CD25+ T、CD8+CD122+T和CD4+CD28- T細(xì)胞百分率不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而CD8+CD28-T細(xì)胞百分率水平在未使用NSAIDs的AS患者組中較高（t=2.765, P=0.009）。CD8+CD28-T細(xì)胞在AS患者和健康對(duì)照人群中細(xì)胞表達(dá)百分率水平之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD8+CD28-T細(xì)胞百分率同患者體內(nèi)炎癥指標(biāo) CRP以及疾病活動(dòng)度指標(biāo) BASFI之間存在正向相關(guān)性（rs=0.383, P

8、=0.041;rs=0.321, P=0.043）。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)外周血CD8+CD122+T細(xì)胞百分率同AS疾病病程具有正向相關(guān)性（rs=0.359, P=0.032），即患者病程越長(zhǎng)，外周血CD8+CD122+T細(xì)胞百分率水平越高；CD8+CD122+T細(xì)胞百分率同炎癥指標(biāo)CRP存在正向相關(guān)性（rs=0.370, P=0.048），同時(shí)在長(zhǎng)病程AS患者中CD8+CD122+T細(xì)胞百分率同CD8+CD28-T細(xì)胞百分率存在正向相關(guān)性（