藏藥浴的文化內(nèi)涵及五味甘露藥浴顆粒對AA模型大鼠滑膜細(xì)胞的炎癥信號通路調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）——屬于藏醫(yī)“真布病”范疇，在藏區(qū)是一種常見疑難性疾病，其發(fā)病率高，致殘率高，并可累及多器官、多系統(tǒng)引起系統(tǒng)性疾病。藏藥浴療法是藏醫(yī)對RA臨床效果確切的常用手段，而“五味甘露”藥浴是藏醫(yī)臨床上治療RA主要使用的成方制劑。藏藥浴已經(jīng)成為國家非物質(zhì)文化遺產(chǎn)保護(hù)項(xiàng)目，以及國家中醫(yī)藥管理局藏醫(yī)重點(diǎn)?？?。目前，對藏藥浴“五味甘露”的研究主要集中在臨床療效與浴后護(hù)理方面，藏藥浴對調(diào)整機(jī)體免疫系統(tǒng)的顯效性和高治愈率的研究也比較廣

2、泛。但從細(xì)胞層面對藏藥五味甘露藥浴顆粒作用于機(jī)體的機(jī)制缺乏系統(tǒng)科學(xué)的研究，對其抗RA的分子作用機(jī)制的研究尚不深入。
　　目的：
　　從藏醫(yī)學(xué)理論及藏藥浴文化內(nèi)涵入手，以藏藥浴臨床經(jīng)驗(yàn)為指導(dǎo)，開展藏藥五味甘露藥浴顆粒藥效及其作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究。從整體動物模型層面，考察五味甘露藥顆粒在治療RA大鼠關(guān)節(jié)炎癥上的藥效作用；從細(xì)胞層面，分析其對RA大鼠滑膜組織中細(xì)胞因子的影響以及對蛋白表達(dá)的調(diào)控作用；從分析生物學(xué)層面，篩選與RA相關(guān)的分

3、子信息，探討五味甘露藥浴顆粒對RA滑膜細(xì)胞的JAK-STAT炎癥信號通路調(diào)控機(jī)制。
　　方法：
　　1.文化研究：從醫(yī)學(xué)人類學(xué)的視野，結(jié)合具體的藏醫(yī)學(xué)歷史和藏族沐浴文化背景，整合文獻(xiàn)學(xué)、田野調(diào)查等研究方法來闡釋藏藥浴的文化內(nèi)涵。
　　2.實(shí)驗(yàn)研究：將大鼠造模經(jīng)藏藥浴治療后：①采用致炎后足容積測量、免疫器官的臟器系數(shù)、及踝關(guān)節(jié)病理形態(tài)的比較，評價五味甘露藥浴顆粒對AA大鼠的治療效果；②采用酶聯(lián)反應(yīng)、免疫組化法檢測并分析五

4、味甘露藥浴顆粒對滑膜組織中細(xì)胞因子及蛋白表達(dá)的干預(yù)效應(yīng)；③采用基因芯片技術(shù)，檢測滑膜細(xì)胞中的JAK-STAT信號通路中相關(guān)信號分子的表達(dá)，并用RT-PCR法進(jìn)行驗(yàn)證，探討五味甘露藥浴顆粒對RA滑膜細(xì)胞的JAK-STAT信號通路的調(diào)控機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1.擁有一千多年歷史的藏藥浴蘊(yùn)含著豐富的藏族沐浴文化，并以藏醫(yī)藥理論為指導(dǎo)在臨床廣泛開展。它集醫(yī)療、養(yǎng)生、保健等多種功能于一體，是具有歷史、文化、經(jīng)濟(jì)等多重價值的藏醫(yī)外治療

5、法。
　　2.五味甘露藥浴顆粒高劑量組（11.80g·L-1）、中劑量組（5.90g·L-1）、低劑量組（2.95g·L-1）AA大鼠原發(fā)性足腫脹度均有減輕，滑膜細(xì)胞增生、炎細(xì)胞浸潤、關(guān)節(jié)軟骨破壞均有不同程度的改善；血清中白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、生長因子（EGF、bFGF、PDGF-BB）、前列腺素E2（PGE2）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-3、TIMP-1）的含量均有不同程度的下降。該藥可以

6、抑制滑膜細(xì)胞JAK-STAT信號通路的激活，使P-STAT1、P-STAT3、IL-6表達(dá)下降，IL-10表達(dá)上升；在JAK-STAT信號通路上Il2rb、Mpl、Stam等相關(guān)信號分子表達(dá)上調(diào)，PIAS1、PIAS3、SOCS4、EPO、IFNGR2等相關(guān)信號分子表達(dá)下調(diào)。
　　結(jié)論：
　　1.藏藥浴既是生物學(xué)意義上的科學(xué)，也是人類學(xué)意義上的文化，具有自然科學(xué)和人文科學(xué)的雙重特征。要充分理解藏醫(yī)藥文化內(nèi)涵，把人文文化和科學(xué)

7、文化相融，借鑒西醫(yī)的科學(xué)技術(shù)手段開展對藏藥浴的現(xiàn)代研究。
　　2.藏藥?。ㄎ逦陡事端幵☆w粒）在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜病理改變的過程中，通過下調(diào)致炎因子(TNF-α、IL-1,6等)、上調(diào)抗炎因子(IL-10)來激活體內(nèi)免疫系統(tǒng)，抑制成纖維樣滑膜細(xì)胞分泌各類細(xì)胞因子對滑膜的刺激，來控制關(guān)節(jié)滑膜炎癥。對滑膜細(xì)胞JAK-STAT炎癥信號通路中相關(guān)信號分子的表達(dá)有良性調(diào)節(jié)作用，進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞核內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄，而最終達(dá)到抑制RA滑膜細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋