牛蛙鏈球菌病的病原及疫苗研究.pdf

1、牛蛙是一種在我國常見的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，牛蛙病害問題日益突出。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，牛蛙疾病分細(xì)菌性疾病、病毒性疾病、寄生蟲病和其他疾病，其中以鏈球菌病、紅腿病、溫和氣單胞菌病等細(xì)菌性疾病對(duì)牛蛙養(yǎng)殖危害較大，流行較廣。本論文主要對(duì)牛蛙鏈球菌病進(jìn)行研究。
　　 2009年，浙江嘉興平湖一牛蛙養(yǎng)殖場暴發(fā)疾病，患病牛蛙,腹部及下肢布滿出血點(diǎn);解剖可見肝呈紫紅色有點(diǎn)狀出血，腎充血呈紫紅色，胃鼓脹充血，有些在胃與腸交接處出現(xiàn)套

2、疊現(xiàn)象。本研究從患病牛蛙的腦、肝組織中分離到細(xì)菌，經(jīng)動(dòng)物回歸試驗(yàn)確定其為病原。形態(tài)學(xué)觀察、生化鑒定和16S rRNA基因序列鑒定該病原菌為無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae）。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明:分離菌株對(duì)環(huán)丙沙星、新霉素、壯觀霉素、呋喃妥因、伊諾沙星敏感，而對(duì)強(qiáng)力霉素、菌必治、頭孢拉定、青霉素G、羅紅霉素、氟哌酸、林可霉素等7種抗生素不敏感。
　　 鏈球菌病目前尚無有效的預(yù)防方法，疫苗研制是一條可行的途

3、徑，本論文進(jìn)一步開展了無乳鏈球菌疫苗的研究。將分離鑒定的無乳鏈球菌培養(yǎng)物用0.4％的甲醛滅活，加弗氏完全佐劑制成滅活全菌苗，對(duì)牛蛙進(jìn)行注射免疫。通過受免牛蛙血清中凝集抗體效價(jià)測定，總蛋白、免疫球蛋白的測定及免疫保護(hù)率的測定，作免疫效果評(píng)價(jià)。研究結(jié)果表明，無乳鏈球菌全菌疫苗能夠提高牛蛙的血清抗體水平及總蛋白、免疫球蛋白含量;此外，無乳鏈球菌全菌苗對(duì)牛蛀抗人工感染也具有較好的免疫保護(hù)作用，其免疫保護(hù)率為67％。因此，將無乳鏈球菌全菌苗用于牛