基因多態(tài)性對霉酚酸藥動(dòng)與藥效學(xué)影響的研究.pdf

1、霉酚酸酯(MMF)是一種新型免疫抑制劑,廣泛應(yīng)用于器官移植和自身免疫性疾病的治療。MMF活性產(chǎn)物霉酚酸(MPA)可選擇性、非競爭性、可逆性的抑制次黃嘌呤核苷酸脫氫酶(IMPDH),從而抑制鳥嘌呤核苷的經(jīng)典合成途徑。MPA主要經(jīng)肝臟內(nèi)代謝酶UGT1A9作用生成無活性的代謝產(chǎn)物MPAG,同時(shí)部分經(jīng)UGT287酶作用形成AcMPAG,MPAG在肝臟和腎臟的排泄主要是由ABCC2介導(dǎo)的。本課題旨在通過探討MPA及其代謝產(chǎn)物的藥動(dòng)學(xué)與不良反應(yīng)之間

2、的關(guān)系、MPA對其靶標(biāo)IMPDH酶活性和mRNA表達(dá)水平的影響,以及基因多態(tài)性對藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)的影響而深入地了解MMF作用個(gè)體差異的機(jī)制。
　　 本項(xiàng)課題分別收集了98例腎移植患者和79例肝移植患者的558份和479份MPA血樣及患者臨床資料,對中國成年腎和肝移植患者口服MMF后MPA及其代謝產(chǎn)物的藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明UGT1A9*1b的基因變異可以影響到MPA和MPAG的AUC,攜帶有UGT1A9-118(dT)

3、10插入堿基變異的個(gè)體,其經(jīng)劑量校正后的MPA AUC6-12水平顯著性的升高(T9:7.34±4.11 mg*h/ml/g；T9/T10:11.54±7.62mg*h/ml/g;T10:11.89±8.76 mg*h/ml/g,P=0.041)。攜帶-118(dT)10等位基因變異的個(gè)體,其經(jīng)劑量校正后的MPAG的AUC0-12(T9:1112.31±553.98 mg*h/ml/g；T9/T10:1247.80±686.81 mg*

4、h/ml/g:T10:1909.55±1309.97 mg*h/ml/g,P=0.023)和 AUC6-12(T9:472.84±217.77 mg*h/ml/g；T9/T10:593.03±407.71 mg*h/ml/g；T10:963.65±7171.23 mg*h/ml/g,P=0.009)也有同樣升高的趨勢。參與MPAG肝臟排泄的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ABCC2的1249 G>A的單核苷酸突變與AcMPAG曲線下面積AUC的升高相關(guān),雜合子

5、GA和野生型GG基因型的個(gè)體AUC0-12/D水平分別為23.96±17.35 mg*h/ml/g和11.20±4.11 mg*h/ml/g,P=0.016。但沒有發(fā)現(xiàn)UGT287和其它相關(guān)酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體基因多態(tài)性對MPA及其代謝物藥代動(dòng)力學(xué)的影響。
　　 腎移植患者M(jìn)PAG的曲線下面積AUC0-12h和服藥12小時(shí)后的濃度C12h在發(fā)生了不良反應(yīng)腹瀉的患者中要顯著低于未發(fā)生腹瀉的患者(AUC0-12h:947.26±524.12

6、mg.h/L vs1395.37±685.99 mg.h/L,P=0.03；C12h:49.57±26.66 mg/L vs76.40±32.37 mg/L,P=0.048),但MPA和AcMPAG未發(fā)現(xiàn)兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差別。且UGT1A9、UGT287和ABCC2基因變異等位基因的發(fā)生頻率在兩組之間沒有區(qū)別。在肝移植患者中,腹瀉組MPA C6h,C10h和C12h的值要高于未發(fā)生腹瀉組(P<0.05),其它參數(shù)沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差

7、別。
　　 人肝細(xì)胞內(nèi)UGT1A9和ABCC2基因mRNA的表達(dá)水平存在顯著的個(gè)體差異,表達(dá)水平最高值與最低值的差異分別有1.46倍和1.43倍。另外ABCC2mRNA的表達(dá)水平(CT值:38.46±3.60)要顯著高于UGT1A9 mRNA的表達(dá)水平(CT值:31.65±2.89)(P<0.0001),但二者的表達(dá)具有非常顯著的相關(guān)性(r=0.842,P<0.0001)。
　　 IMPDH的活性在服用MMF后顯著降低,

8、并且隨肝移植術(shù)后時(shí)間的增加而有上升趨勢,但I(xiàn)MPDH mRNA表達(dá)水平變化不明顯。服藥后12h內(nèi)IMPDH活性變化趨勢與MPA和AcMPAG的血藥濃度變化趨勢成反比關(guān)系,當(dāng)MPA和AcMPAG達(dá)峰濃度時(shí),IMPDH活性最低。IMPDH基因的兩個(gè)亞型IMPDH1和IMPDH2的mRNA的表達(dá)水平存在顯著相關(guān),相關(guān)系數(shù)r=0.768(P<0.01)。但術(shù)后一周和術(shù)后一個(gè)月及三個(gè)月時(shí)的數(shù)據(jù)分析,沒有發(fā)現(xiàn)MPA和.AcMPAG與IMPDH活性及

9、mRNA表達(dá)水平之間的聯(lián)系。但術(shù)前IMPDH的活性和術(shù)前IMPDH mRNA的表達(dá)水平呈現(xiàn)顯著相關(guān),IMPDH1和IMPDH2相關(guān)系數(shù)分別是0.53(P=0.075)和0.744(P=0.006)。此外,我們對IMPDH1基因上的rs1042259和IMPDH2的rs11557540單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)的分析,在我們研究的中國肝移植患者中,沒有發(fā)現(xiàn)突變的等位基因。
　　 綜上所述,本課題分析了基因多態(tài)性對MMF代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影