非小細胞肺癌病人圍術期三種循環(huán)腫瘤細胞及其上TAZ基因表達的檢測.pdf

1、肺癌目前是引起全世界引起死亡所占比例最大的癌癥，全球每年約有150余萬人死于肺癌。近年來，雖然肺癌的手術治療及放化療治療領域取得了一些進展，但肺癌的治愈率仍然令人失望，而且5年生存率也維持在比較低的水平，約為15％。肺癌根據(jù)組織學類型，可以分為非小細胞肺癌和小細胞肺癌兩種。其中，非小細胞肺癌約占肺癌總數(shù)的85％至90％，其中又分為肺鱗狀上皮細胞癌（約占25％至30％）、肺腺癌（約占40％）及肺大細胞癌（又名肺未分化癌，約占10％至15％

2、）。一般來說，這三種組織亞型非小細胞肺癌預后并無明顯差異。
　　造成非小細胞肺癌預后不良的主要因素是遠處轉移，遠處轉移可以在非小細胞肺癌患者早期就發(fā)生。這就解釋了為什么非小細胞肺癌患者在切除原發(fā)病灶后仍然會復發(fā)。關于腫瘤灶為什么在早期就可發(fā)生轉移一直是一個有爭論的話題。比較被學術界認可的觀點是，腫瘤灶上的腫瘤細胞通過上皮-間質轉化作用從較為穩(wěn)定的上皮型腫瘤細胞轉化為間質型腫瘤細胞，這一轉化使得腫瘤細胞具有更強的侵襲性。這些腫瘤細胞

3、入血形成循環(huán)腫瘤細胞，隨著血液流動播散至全身各處形成局部腫瘤灶。
　　上皮-間質轉化指的是上皮細胞經過一系列生物化學反應轉化為間質表型細胞的過程，多種通路在這一進程中扮演重要作用。其中Hippo通路中的Hippo首次發(fā)現(xiàn)于果蠅遺傳功能篩選實驗中，Hippo是一條較為穩(wěn)定的信號傳導途徑。最近幾年研究發(fā)現(xiàn)，hippo通路的異常狀態(tài)及其下游的TAZ基因的過度激活被認為有促上皮間質轉化作用，在腫瘤發(fā)生發(fā)展進程中有重要作用。所以，我們擬通過

4、檢測非小細胞肺癌患者血中不同分型循環(huán)腫瘤細胞的數(shù)量及其上TAZ基因的表達，結合患者臨床數(shù)據(jù)及手術操作的進行分析，為評估非小細胞肺癌患者病情和評價手術效果提供良好依據(jù)。
　　目的：
　　本研究首次采用廣州益善生物技術股份有限公司開發(fā)的CanPatrolTM循環(huán)腫瘤細胞檢測技術，通過RNA探針對收集的循環(huán)腫瘤細胞進行基因核酸定位，從而對收集到的細胞進行分型和鑒定。在鑒別過程中，創(chuàng)新性地加入了波形蛋白和扭曲蛋白的序列，使得可以完全

5、分離出循環(huán)腫瘤細胞中的間質型細胞和雙表型細胞。我們就可以分別計數(shù)不同的循環(huán)腫瘤細胞，聯(lián)系臨床病理數(shù)據(jù)對患者的病情進行評估。同樣的，我們在捕獲的循環(huán)腫瘤細胞上檢測了與上皮間質轉化有關的腫瘤基因TAZ的表達，根據(jù)不同臨床病理學信息下TAZ基因陽性率的不同，來進一步評估患者的病情。
　　方法:
　　選擇南方醫(yī)科大學附屬南方醫(yī)院胸外科確診可行手術根治性切除的非小細胞肺癌病人39例，分別于術前第一天和術后第五天分別抽取外周靜脈血液5m

6、l。后使用RNA探針技術檢測循環(huán)腫瘤細胞的分型及其上TAZ基因的表達。
　　結果:
　　1.早期非小細胞肺癌患者血中即有循環(huán)腫瘤細胞，陽性率為89.5％。
　　2.上皮型循環(huán)腫瘤細胞隨著非小細胞肺癌TNM分期的上升逐漸上升，結果有統(tǒng)計學意義(0.5vs.1.5vs.5.0，P=0.037)。
　　3.TAZ基因在EGFR野生型非小細胞肺癌患者的循環(huán)腫瘤細胞上的陽性率顯著高于EGFR突變型非小細胞肺癌患者(49.1

7、％vs.29.8％，P=0.047)。
　　4.TAZ基因的陽性率在縱隔淋巴結陽性(49.1％vs.29.8％，P=0.047)、高TNM分期(49.1％vs.29.8％，P=0.047)、CEA異常(60.0％vs.22.7％，P=0.014)和NSE(63.8％vs.47.0％，P=0.042)異常的非小細胞肺癌病人中更高。
　　5.根治性手術前后相比TAZ基因的陽性率有所下降。
　　6.我們使用在線工具(http