Dicer酶在實(shí)驗(yàn)性肝纖維化過程中的表達(dá)研究.pdf

1、目的
　　 動態(tài)觀察大鼠肝纖維化過程中Dicer酶在肝臟中的表達(dá)情況,初步探討Dicer與肝纖維化病變進(jìn)展的關(guān)系及其可能的機(jī)制。
　　 方法
　　 1.建立40％CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型:49只雄性SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對照組,其中實(shí)驗(yàn)組和對照組都被分為1周組、2周組、3周組、4周組、5周組、6周組和7周組。實(shí)驗(yàn)組給予40%CCl4橄欖油溶液1ml/kg腹腔注射,每周1次,對照組給予同等濃度的生理鹽水和橄

2、欖油混懸液腹腔注射。分別于造模第1周至第7周末處死相對應(yīng)的實(shí)驗(yàn)組及對照組大鼠,采集血清標(biāo)本及肝臟組織標(biāo)本。
　　 2.對肝組織進(jìn)行常規(guī)HE染色及觀察大鼠肝臟組織病理變化情況,評價(jià)大鼠肝纖維化程度。
　　 3.檢測血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase,AST)濃度,評價(jià)肝細(xì)胞功能狀態(tài)。
　　 4

3、.采用實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄PCR(Realtime RT-PCR)方法檢測正常對照組及模型組各只大鼠肝臟組織中Dicer的表達(dá)。
　　 結(jié)果
　　 1.實(shí)驗(yàn)組大鼠血清中ALT及AST的水平從第二周開始明顯升高,與對照組大鼠相比差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 2.隨著造模時(shí)間的延長,對照組大鼠肝臟小葉結(jié)構(gòu)、肝細(xì)胞形態(tài)大小等無明顯改變,未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤;對實(shí)驗(yàn)組大鼠,隨著CCl4作用的時(shí)間和劑量逐漸增加,大鼠肝纖

4、維化程度逐步加重。
　　 3.在大鼠肝纖維化的過程中,實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟組織中的Dicer表達(dá)水平從第四周開始升高,在第五周時(shí)達(dá)到峰值,第六周時(shí)Dicer的表達(dá)水平又開始下調(diào),根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)論,其差異是有顯著性的(P＜0.05)。其中,實(shí)驗(yàn)組大鼠在第五周時(shí)肝臟組織中Dicer的表達(dá)明顯高于正常對照組織,差異有顯著性(P＜0.05),在其他各時(shí)間點(diǎn),實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟組織中的Dicer表達(dá)水平與對照組相比無明顯差異(P＞0.05)。另外,對

5、于對照組大鼠,在各時(shí)間點(diǎn)肝臟組織中Dicer的表達(dá)水平無明顯差異(P＞0.05)。
　　 4.Spearman秩相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析表明在模型組大鼠肝纖維化過程中,肝臟組織中Dicer的表達(dá)水平與大鼠體重和肝功能指標(biāo)ALT、AST之間無顯著相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1.在大鼠肝纖維化過程中,肝臟組織中Dicer的表達(dá)水平與大鼠體重和肝功能指標(biāo)ALT、AST之間無顯著相關(guān)性。
　　 2.在CCl4