父代高血糖改變子代下丘腦攝食調(diào)節(jié)神經(jīng)通路加速肥胖形成的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　研究表明，妊娠期合并糖尿病可引起子代代謝紊亂，增加子代患糖尿病和其他代謝性疾病的風(fēng)險。而父代高血糖對子代的影響目前研究較少，且集中于流行病學(xué)調(diào)查和臨床特征的觀察，缺乏深度的機(jī)制研究。本研究旨在探討父代高血糖對子代代謝特征的影響以及可能的中樞調(diào)控機(jī)制。
　　方法：
　　在重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心購買健康、年齡匹配（約6周齡）的雌性和雄性SD大鼠各15只，飼養(yǎng)于SPF房間。喂養(yǎng)2周后，按每只大鼠35mg/kg的

2、劑量，雄性SD大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）或者等體積檸檬酸鹽緩沖液（CB），建立父代高血糖模型（血糖高于16.7mmol/L）和對照模型，兩組雄性大鼠與正常雌性SD大鼠交配。兩組子代（STZ-O和CB-O）離乳后以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，連續(xù)每周監(jiān)測體重；在子代6周齡時施以禁食-復(fù)進(jìn)食試驗(yàn)；在24-26周齡期間監(jiān)測連續(xù)3周的攝食量；成年期進(jìn)行冷暴露（4℃）6h處理。HE染色觀察脂肪組織脂質(zhì)沉積情況；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清中瘦素（

3、Leptin）和a-黑素細(xì)胞刺激素（a-MSH）水平；實(shí)時熒光定量PCR（real-time q-PCR）檢測子代下丘腦中瘦素受體（Lepr）、神經(jīng)肽Y（NPY）、阿片-促黑素細(xì)胞皮質(zhì)素原（POMC）、細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白-3（SOCS3）、前蛋白轉(zhuǎn)化酶1（PC1）和2（PC2）、羧肽酶E（CPE）以及冷刺激下棕色脂肪組織中解偶聯(lián)蛋白（UCP1）的mRNA表達(dá)水平；蛋白免疫印跡法（western blotting）檢測下丘腦中瘦素信

4、號通路相關(guān)基因磷酸化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子-3（p-STAT3）和SOCS3的蛋白表達(dá)水平；免疫組化石蠟切片法（IHC-P）檢測兩組子代棕色脂肪組織中UCP1的相對表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)多次檢測STZ組大鼠的血糖水平顯著高于CB組，并且持續(xù)高于16.7mmol/L，表明父代高血糖動物模型構(gòu)建成功。對兩組子代進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)：與CB-O相比，STZ-O的體重和攝食量均明顯增加；同時，STZ-O的脂肪組織重量增加，血清中TG水

5、平和leptin水平明顯升高，而a-MSH水平則顯著降低；下丘腦中瘦素介導(dǎo)的JAK/STAT3通路中，p-STAT3的表達(dá)下降，Lepr的表達(dá)有下降的趨勢，NPY的表達(dá)上調(diào)，POMC的表達(dá)則下調(diào)，PC1、PC2和CPE也相應(yīng)下調(diào)；冷刺激下，STZ-O的棕色脂肪組織中UCP1的mRNA和蛋白表達(dá)均顯著下降，產(chǎn)熱活性受損。
　　結(jié)論：
　　父代高血糖可引起子代食欲旺盛、產(chǎn)熱能力受損，導(dǎo)致體重增加，加速肥胖的形成；其機(jī)制可能與瘦素