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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
實(shí)驗(yàn)通過(guò)老齡大鼠有氧運(yùn)動(dòng)和心肌線(xiàn)粒體能量代謝之間的關(guān)系,結(jié)合自由基代謝的情況,通過(guò)觀察老齡大鼠有氧運(yùn)動(dòng)模型中,三羧酸循環(huán)中的限速酶,檸檬酸合成酶(CS)、異檸檬酸脫氫酶(ICD)、α-酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC),呼吸鏈酶復(fù)合體(I、II、III、IV)及H﹢- ATP酶的活性變化規(guī)律以及自由基代謝的情況,尋找衰老機(jī)制,力求從線(xiàn)粒體能量代謝上解釋有氧運(yùn)動(dòng)延緩衰老的作用。
實(shí)驗(yàn)方法:
選取2月
2、和12月齡雌性健康Wistar大鼠各20只共40只,動(dòng)物先在跑臺(tái)上進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練1周(0°、8.2m/ min、5 min/天),正式訓(xùn)練采用中等強(qiáng)度(相當(dāng)于64%±4.5VO2max)坡度50,15.2m∕min,第1天運(yùn)動(dòng)15 min、第2天30min、從第3天開(kāi)始運(yùn)動(dòng)45min,每周6天,共12周。大鼠訓(xùn)練第12周結(jié)束24小時(shí)后取材,麻醉狀態(tài)下置于冰盤(pán)上剖腹并取出大鼠心臟,進(jìn)行檸檬酸合成酶(CS)、異檸檬酸脫氫酶(ICD)、α-酮
3、戊二酸脫氫酶活性測(cè)定(α-KGDHC),呼吸鏈復(fù)合物(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ),H﹢- ATP酶活性的測(cè)定,Mn+-SOD、GSH-PX、CAT的活性和MDA含量的測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
(1)有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)老齡大鼠心肌線(xiàn)粒體中三羧酸循環(huán)限速酶活性的影響本研究觀察到:MC15組較MC5組(CS)和α-KGDHC的活性降低但無(wú)顯著性差異、ICD顯著降低(P﹤0.05)存在顯著性差異,通過(guò)有氧運(yùn)動(dòng)后,MT15組高于MC5組CS的活性(P
4、﹤0.05)存在極顯著性差異,ICD和α-KGDHC的活性無(wú)顯著性差異;MT15組和MT5組CS的活性高于各自對(duì)照組(P﹤0.01)存在極顯著性差異而ICD、α-KGDHC的活性(P<0.05)存在顯著性差異;MT15組低于MT5組CS的活性(P﹤0.01)存在極顯著性差異、ICD和α-KGDHC的活性(P<0.05)存在顯著性差異。
(2)有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)老齡大鼠心肌線(xiàn)粒體呼吸鏈酶復(fù)合物Ⅰ~Ⅳ活性的影響本研究觀察到:MC15較MC
5、5組復(fù)合物Ⅰ顯著降低(P<0.05),復(fù)合物Ⅱ和Ⅳ有所下降分別下降了7.3%和14.5%而復(fù)合物Ⅲ上升了6.6%,有氧運(yùn)動(dòng)后,MT15組高于MC5組復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ無(wú)顯著性差異、復(fù)合物Ⅳ活性(P<0.05)存在顯著性差異;MT5組和MT15組高于各自對(duì)照組復(fù)合物Ⅰ(P<0.01)存在極顯著性差異,復(fù)合物Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ(P<0.05)存在顯著性差異、而復(fù)合物Ⅳ活性 MT5高于MC5和復(fù)合物Ⅲ MT15組高于MC15活性均無(wú)明顯性差異,MT15
6、組較MT5復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ也存在無(wú)顯著性差異。
(3)有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)老齡大鼠心肌線(xiàn)粒體H﹢- ATP酶活性的影響本研究觀察到:MC15組較MC5組有所下降,下降了45.2%,有氧運(yùn)動(dòng)后:MT15組與MC5組(P<0.05)存在顯著性差異;MT5組和MT15組顯著高于各自對(duì)照組;MT5組和MC5組比較(P<0.05)存在顯著性差異而MT15組和MC15(P<0.01)存在極顯著性差異,MT15組低于MT5組無(wú)顯著性差異。
7、 (4)有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)老齡大鼠心肌線(xiàn)粒體自由基代謝相關(guān)指標(biāo)的影響本研究觀察到:MC15組較MC5組Mn+-SOD的活性升高(P<0.05)存在顯著性差異,GSH-PX活性有所下降,下降了2.7%,CAT活性下降(P<0.01),存在極顯著性差異,MDA含量MC15組高于MC5組無(wú)明顯差異,有氧運(yùn)動(dòng)后:MT15組較MC5組Mn+-SOD和GSH-PX活性升高(P<0.01)存在極顯著性差異而CAT活性的活性有所升高無(wú)明顯差異, MDA含量有
8、所下降無(wú)明顯差異;MT5組和MT15組顯著高于各自對(duì)照組Mn+-SOD、GSH-PX和CAT的活性P<0.01存在極顯著性差異,MT15組較MC15組Mn+-SOD活性升高和MT5組較MC5組CAT的活性升高(P<0.05)均存在顯著性差異,MDA含量MT5組與MC5組無(wú)明顯差異,而MT15組較MC15明顯下降,降低了39.3%但不存在顯著性差異,而MT15組較MT5組Mn+-SOD的活性、MDA含量的升高和CAT活性降低,均無(wú)顯著性差
9、異,GSH-PX活性降低(P<0.01)存在極顯著性差異。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:
(1)有氧運(yùn)動(dòng)能提高了老齡大鼠心肌線(xiàn)粒體中限速酶的活性,進(jìn)一步說(shuō)明有氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能夠提高有氧氧化供能系統(tǒng)三羧酸循環(huán)限速酶的活性從而改善供能能力。
(2)有氧運(yùn)動(dòng)提高老齡大鼠心肌線(xiàn)粒體呼吸鏈Ⅰ~Ⅳ的活性,以致H+-ATP酶的活性進(jìn)而能量代謝水平得到提高。
(3)有氧運(yùn)動(dòng)可通過(guò)抗氧化作用而改善老齡大鼠心肌線(xiàn)粒體能量代謝水平,以及提高
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