利用表達譜芯片技術篩選家兔肌肉發(fā)育相關基因.pdf

1、兔肉是一種高蛋白、高卵磷脂、高氨基酸和低膽固醇的肉類，是肥胖、肝病、心腦血管病、糖尿病患者的理想肉食。雖然兔肉是一類優(yōu)質的肉類食品，但由于人們飲食習慣和家兔飼養(yǎng)管理因素的制約，推廣和普及程度還較低。此外，目前國內對家兔肉質性狀的研究遠不及豬肉、禽肉等，這也是制約肉兔產業(yè)發(fā)展的一個重要因素。本研究選擇新西蘭白兔和福建黃兔作為研究對象，旨在探尋影響家兔肌肉發(fā)育的相關功能基因，為家兔肉質性狀的改良提供一定的理論基礎，也為肉用家兔的育種工作提供

2、一定的借鑒。
　　本研究利用表達譜芯片、熒光定量PCR、PCR-SSCP等技術分析引進品種新西蘭白兔和我國地方品種福建黃兔這兩個肉兔品種的遺傳差異，主要結果如下:
　　1.利用表達譜芯片技術篩選出了新西蘭白兔和福建黃兔不同部位肌肉中的差異表達基因，包括Myh6、Myh7、Myh7b、Myo5b、Tnnc1、Tpm3、Acta2等，以上基因的表達差異水平都在3倍以上，并且與肌肉的發(fā)育聯系十分緊密。
　　2.熒光定量PCR

3、結果顯示家兔不同部位肌肉中Tpm3和Myh7基因的表達規(guī)律比較相似，兩個基因在背肌中的表達水平總體上高于腿肌。從兩個基因較為相似的時空表達規(guī)律來看，它們可能具有協同作用。
　　3.本研究挑選Myh7基因第5外顯子設計引物，該外顯子總長度為109bp，所擴增的片段包括該外顯子全長及部分前后的內含子，總長度145bp。在新西蘭白兔群體中發(fā)現47個AA型個體，5個AB型個體;在福建黃兔群體中發(fā)現52個AA型個體，14個AB型個體，兩個群

4、體中均未發(fā)現BB型個體。新西蘭白兔群體中A（未突變）基因頻率為0.952，B（突變）基因頻率為0.048;福建黃兔群體中A（未突變）基因頻率為0.894，B（突變）基因頻率為0.106。對PCR產物進行測序比對發(fā)現，在2375處發(fā)生單堿基突變位點，原序列上該位點為胞嘧啶(C)，在少數個體中發(fā)現了胸腺嘧啶(T)。經序列分析和密碼子比對，此突變并未引起氨基酸的改變，為同義突變。Myh7蛋白二級結構含有1935個氨基酸，其中α螺旋(h)74.