Bcl-2在骨骼肌遠(yuǎn)隔后處理心臟保護(hù)中的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：前期研究表明，Bcl-2可以介導(dǎo)骨骼肌遠(yuǎn)隔后處理對心臟的保護(hù)作用(待發(fā)表)。本研究預(yù)觀察Bcl-2對骨骼肌遠(yuǎn)隔后處理的心臟保護(hù)作用是否被線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(Mitochondrial Permeability TransitionPore，mPTP)啟閉調(diào)節(jié)，是否經(jīng)線粒體ATP敏感的鉀通道(MitochondrialATP-Sensitive K+Channels，mKATP)啟閉調(diào)節(jié)及mPTP與mKATP的相對位置如何?

2、　　方法：健康新西蘭大白兔30只，隨機(jī)分為5組(n=6)，開胸結(jié)扎冠狀動脈左室支45分鐘，之后進(jìn)行2小時(shí)再灌注制作缺血再灌注模型。同時(shí)行雙側(cè)髂外動脈固定部位短暫結(jié)扎5min制作骨骼肌短暫缺血模型。隨機(jī)分組如下：缺血再灌注組(Con)、骨骼肌遠(yuǎn)隔后處理組(RemotePost-conditioning，RPostC)、骨骼肌遠(yuǎn)隔后處理組+HA14-1+CsA(RPostC+HA14-1+CsA)、骨骼肌遠(yuǎn)隔后處理組+5HD(RPostC+

3、5HD)、骨骼肌遠(yuǎn)隔后處理組+HA14-1+CsA+5HD(RPostC+HA14-1+CsA+5HD)。其中，HA14-1(2mg/kg)是選擇性Bcl-2抑制劑；CsA(5mg/kg)是直接mPTP開放抑制劑；5HD(5mg/kg)，即5羥基奎酸鹽，一種線粒體ATP敏感的鉀通道阻斷劑。然后以Evans藍(lán)標(biāo)記心肌缺血區(qū)范圍，以TTC法檢測心肌梗死范圍，并分別于缺血前、后及再灌注1、2小時(shí)測定血漿磷酸肌酸激酶(CK)活性和乳酸脫氫酶(L

4、DH)含量。
　　結(jié)果：
　　1.血流動力學(xué)指標(biāo)在冠狀動脈缺血前，各組間HR和MAP差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在冠狀動脈缺血期間，各組間HR均呈上升趨勢、MAP均呈下降趨勢，但是這種變化各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2.心律失常觀察2.1心律失常類型：
　　在基礎(chǔ)狀態(tài)下，各組均未發(fā)生任何心律失常。在冠狀動脈缺血后，出現(xiàn)多種形式心律失常，其中包括室性早搏、室早二聯(lián)律、短陣室速，心室顫動(給予抗心

5、律失常藥物利多卡因后可終止)，其中以室性早搏為主，各組早搏(室早二聯(lián)律和短陣室速發(fā)生次數(shù)較少，故均以早搏個(gè)數(shù)統(tǒng)計(jì))分別為：Con組：82.5±25.44個(gè)；RPostC組：177.5±201.73個(gè)；RPostC+HA14-1+CsA組：62.83±43.91個(gè)；RPostC+5HD組：161.67±150.26個(gè)；RPostC+HA14-1+CsA+5HD組：138.33±83.43個(gè)。但各組間心律失常的發(fā)生無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05

6、)。僅前期研究RPostC+HA14-1組于缺血期出現(xiàn)心室顫動1次，給予抗心律失常藥物(利多卡因)后立即終止。
　　2.2心律失常發(fā)生時(shí)間在冠狀動脈缺血前，各組均未發(fā)生任何心律失常。冠狀動脈缺血后，出現(xiàn)多種形式心律失常，但多發(fā)生于冠狀動脈缺血后15min內(nèi)，各組早搏分別為：Con組：67±25.05個(gè)；RPostC組：152.33±166.92個(gè)；RPostC+HA14-1+CsA組：50.33±32.14個(gè)；RPostC+5HD

7、組：107.5±133.56個(gè)；RPostC+HA14-1+CsA+5HD組：110±68.32個(gè)。但各組間缺血15min內(nèi)室性早搏的發(fā)生次數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。缺血15min后心律失常明顯減少，各組早搏分別為：15±0.84個(gè)、23.4±42.79個(gè)、12±12.86個(gè)、52.67±85.4個(gè)、16.17±12.29個(gè)。且各組間缺血15min后心律失常的發(fā)生亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。再灌注心律失常多發(fā)生于再灌注開始后1

8、0min之內(nèi)，再灌注10min后心律失常明顯減少或者消失。本次實(shí)驗(yàn)中，各組間再灌注心律失常的發(fā)生次數(shù)較少，且各組間相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.心肌缺血及梗死程度測定3.1心肌缺血程度的測定從本研究得出：Con組、RPostC組及RPostC+HA14-1組缺血面積分別為：41.04±6.44％、34.09±6.67％、40.77±2.39％，但其三組間缺血程度無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在此基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步研

9、究得出，RPostC+HA14-1+CsA組缺血面積為36.79±3.71％；RPostC+5HD組缺血面積為35.52±4.08％；RPostC+HA14-1+CsA+5HD組缺血面積為：42.41±5.99％。且Con、RPostC、RPostC+HA14-1+CsA、RPostC+5HD及RPostC+HA14-1+CsA+5HD各組間心肌缺血程度亦無顯著性差異(P＞0.05)。
　　3.2心肌梗死程度的測定與Con組相比，

10、RPostC組梗死面積明顯減少(29.54％±5.38％vs66.18％±9.68％，P＜0.05)。
　　前期研究表明：與RPostC組相比，RPostC+HA14-1組梗死面積明顯增加(68.75％±10.75％vs29.54％±5.38％，P＜0.05)。
　　與RPostC+HA14-1組相比，RPostC+HA14-1+CsA組梗死面積明顯減少(57.44±5.71％vs68.75±10.75％，P＜0.05)。<

11、br>　　與RPostC組相比，RPostC+5HD組心肌梗死面積明顯增加(56.48±14.06％vs29.54±5.38％，P＜0.05)。
　　與RPostC+HA14-1+CsA組相比，RPostC+HA14-1+CsA+5HD組心肌梗死面積明顯增加(65.6±14.06％vs57.44±5.71％，P＜0.05)。
　　4.血清肌酸激酶(CK)及乳酸脫氫酶(LDH)的變化前期研究表明：與Con組相比，RPostC組

12、于再灌注60min末及再灌注120min末LDH有減少趨勢，分別為：再灌注60min末：312.97±116.73 U/Lvs421.93±168.32 U/L；再灌注120min末：347.75±94.07 U/Lvs440.57±149.54 U/L。與RPostC組相比，RPostC+HA14-1組再灌注120min末LDH有上升趨勢，分別為：498.47±62.22 U/L vs347.75±94.07 U/L，但這種變化無統(tǒng)計(jì)

13、學(xué)差異，且Con、RPostC、RPostC+HA14-1三組間CK及LDH均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　從本研究看出：與RPostC+HA14-1組相比，RPostC+HA14-1+CsA組再灌注60min末LDH含量呈下降趨勢，分別為：344.32±105.36 U/L vs433.78±103.06 U/L，但這種變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與RPostC組相比，RPostC+5HD組再灌注60min、再灌注1

14、20min末LDH含量呈上升趨勢，分別為：322.77±94.35 U/L vs312.97±116.73 U/L、357.05±66.2 U/L vs347.75±94.07 U/L，但這種變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。且Con組、RPostC組、RPostC+HA14-1+CsA組、RPostC+5HD組及RPostC+HA14-1+CsA+5HD組間相比，CK及LDH無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：