產(chǎn)脂肪酶微生物的篩選及其在手性酯拆分中的應(yīng)用.pdf

1、手性藥物一直是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。藥物的立體化學(xué)決定了其生物活性，立體選擇性已成為催化領(lǐng)域的一個(gè)關(guān)健因素。酶催化因具有反應(yīng)條件溫和、選擇性高、副反應(yīng)少和環(huán)境污染小等優(yōu)點(diǎn)，在有機(jī)合成中有極其重要的應(yīng)用價(jià)值。微生物脂肪酶是一種重要的工業(yè)酶類，被廣泛應(yīng)用于手性化合物的拆分等方面，應(yīng)用前景十分廣闊。
　　 丁基苯酞(商品名：NBP)是國家一類新藥，可有效治療腦血管疾病，其中起主要作用的是S-(-)-NBP，可參與多個(gè)病理環(huán)節(jié)的治療，對(duì)S-

2、(-)-NBP的成功研制和開發(fā)將給社會(huì)帶來很大的經(jīng)濟(jì)效益。
　　 本課題在下列方面進(jìn)行了研究：
　　 1)采用平板透明圈法對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏的三種微生物產(chǎn)脂肪酶能力進(jìn)行初步篩選；
　　 2)以醋酸和苯甲酸為羧酸，仲丁醇，α-苯乙醇和丙酮縮甘油為手性醇，合成了具有不同代表性的手性酯：仲丁醇醋酸酯、仲丁醇苯甲酸酯、α-苯乙醇醋酸酯、丙酮縮甘油醋酸酯、丙酮縮甘油苯甲酸酯；
　　 3)以初選微生物產(chǎn)的脂肪酶為生物催化劑

3、，通過對(duì)上述手性酯的水解拆分實(shí)驗(yàn)，確定華根霉為最合適的產(chǎn)脂肪酶微生物，并對(duì)不同的手性酯表現(xiàn)出較高的選擇性；
　　 4)對(duì)華根霉液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)脂肪酶的過程參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，在最佳培養(yǎng)基組成及培養(yǎng)條件下，發(fā)酵酶活可達(dá)15U/mL；
　　 5)采用華根霉菌所產(chǎn)的脂肪酶作為催化劑，以外消旋的仲丁醇醋酸酯、仲丁醇苯甲酸酯、苯乙醇醋酸酯的酶法拆分為模型反應(yīng)，對(duì)該脂肪酶的立體選擇性及拆分能力進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明華根霉菌所產(chǎn)的脂肪酶對(duì)仲丁醇